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- 至 开始， 添加 羧苄青霉素 和 一 毫摩尔（mM） IPTG 到 对照 和 测试 培养 烧瓶 含有 S 基础的 培养基 离心 a 管 含有 幼虫 在 生长 阶段 一， 也 称为 L1 幼虫， 用于 a 少数 分钟 现在 移除 的 上清液 和 位置 二 微升 的 L1s 开启 一个 琼脂 板 放置 的 培养皿 下 a 解剖 显微镜 和 计数 的 数量 的 幼虫
添加 RNA干扰 细菌 携带 a 非特异性 RNA干扰 质粒 至 的 对照 烧瓶 和 细菌 与 基因- 靶向 RNAi 到 的 测试 烧瓶 这 量 的 细菌 添加 应该 是 成比例的 到 的 数量 的 线虫。
让 的 幼虫 生长 与 连续的 振荡 到 确保 正确的 氧合 这 幼虫 喂养 在 的 细菌 内部 的 幼虫 的 小 干扰 RNA 结合 到 的 互补的 mRNA 产生 由 的 靶向的 基因 和 抑制 蛋白 表达 最后， 检查 的 线虫 用于 你的 表型 的 兴趣。
在 的 示例 方案 我们 将 处理 L1 幼虫 与 RNAi 靶向 的 daf-2 基因 在 液体 培养。
- 至 开始 治疗 添加 207.45 毫升 的 S 基础的 培养基 与 额外的 试剂 作为 描述 在 的 伴随的 text 实验方案 到 a 2,800 毫升 Fernbach 培养 烧瓶 添加 a 最终 浓度 的 50 微克 每 毫升 的 羧苄青霉素 和 1 毫摩尔（mM） 的 IPTG, 和 关闭 的 烧瓶 与 a 膜 螺钉 帽
取 的 L1s 出 的 的 25 度 摄氏度 培养箱 和 转移 它们 至 15 毫升 管 离心 的 L1s 在 1,900 次 g 用于 三 分钟 之后 旋转， 移除 的 上清液 下 a 显微镜, 计数 的 L1s 每 二 微升, 和 平均值 的 数字 获得 从 在 最少 九 滴
接下来， 将 50,000 条线虫 用于 the 年轻 线虫 收集 以及 100,000 条线虫 用于 the 衰老 线虫 收集 分入 四个 Fernbach 培养瓶 中 ，上述培养瓶 在 the 前一步 骤中已准备好。 然后 按 控制 RNAi 细菌 和 RNAi 细菌 与 the 目标 基因 相对应 的比例 添加至 the 线虫 的 数量。
之后 添加 细菌 完整 蠕虫 培养 与 S 基础的 至 带来 的 总计 体积 到 300 毫升 孵育 的 线虫 培养 在 25 度 摄氏度 在 a 振荡 培养箱 与 150 RPM 直到 收集