四通道嗅觉仪检测：一种评估气味线索诱导反应的方法 果蝇

- A 四通道 嗅觉仪 是 a 关闭 室 与 单向 孔 在 每个 角落， 通过 哪个 它 能 递送 向上 至 四 气味， 创建 象限 与 不同的 气味 谱型 开始 一个 实验 由 转移 清醒状态 果蝇 进入 的 室 避免 麻醉， 作为 此 可能 影响 它们的 行为 在……期间 的 实验

暴露 的 果蝇 至 清洁 空气 和 观察 它们的 运动 至 制备 确定 那 无 气味分子 是 污染 的 嗅觉仪 和 影响 果蝇 行为 然后， 准备 的 测试 气味分子 在 分离 小瓶 和 连接 它们 至 的 主 室 通过 的 单向 孔口 暴露 的 果蝇 至 的 气味分子 用于 a 预设 周期， 移除 的 刺激 之后 的 试验 具有 结束。

果蝇 倾向于 至 避免 象限 与 驱避剂 气味 当 移动 朝向 和 静置 在 象限 与 有吸引力的 气味 测量 的 果蝇的 气味线索 行为 反应 由 追踪 它们的 位置 结束 时间 作为 它们 探索 的 嗅觉仪

在 的 随后 方案 我们 将 使用 a 四象限 嗅觉仪 与 一个 空气 递送 系统 至 分析 果蝇 行为 在 反应 至 乙基 丙酸, a 驱避剂 气味剂， 以及 苹果 苹果酒 醋， 哪个 是 有吸引力的

- 在 最少 五 分钟 在 前进， 切换 开启 的 温度 控制器 和 设置 它 至 25 度 摄氏度 然后， 连接 的 气味分子 腔室 至 的 实验区 通过一个 塑料 管 检查 的 气流 速率 在 每个 象限 的 的 实验区 使用 一个 电子的 气流 米 制备 确定 那 的 对照 和 气味 和 空气 气流 是 两者 运行 在 100 毫升 每 分钟

- 果蝇 对 气流 非常 敏感，气流 且 在 每次 实验 前 都 必须 确认 每个 象限 的 气流 是否 正常 运行。

- 现在， 使用 70% 乙醇 清洁 实验 区域 和 玻璃 板。 将所有部件擦拭两到三遍， 并 在 继续 操作 前 让 其 充分 自然 晾干。 接下来， 将 玻璃 板 夹紧 固定 在 实验 区域 上。 然后， 在 无 麻醉 条件下 将 果蝇 转移 至 实验 区域 内。 利用 重力 使 果蝇 从 其中 一块 玻璃 板 的 孔洞 中 进入 实验 区域， 随后 用 圆形 网筛 盖住 该 孔洞。

现在， 放置 的 已加载果蝇 实验区 进入 的 避光 小室 然后， 连接 的 四 对照 空气 气流 至 每个 实验区 角落 关闭 的 门 的 的 腔室 和 让 的 果蝇 适应环境 至 的 新 环境 用于 10 至 15 分钟

之后 的 适应 周期， 运行 a 5 至 10 分钟 对照 实验 在 哪个 果蝇 是 暴露 至 四 对照 空气 气流 它 是 必需的 至 现在 分析 的 数据 立即。 如果 的 果蝇 是 不 均匀地 分布 在 的 arena 的 实验区 必须 是 重置。

- 它 是 关键 至 测试 的 行为 的 对照 果蝇 至 仅 清洁 空气 这 将 迅速地 验证 那 全部 背景 条件 是 正常。 泄漏 光， 温度 不平衡， 倾斜的 实验区 或 一个 气味 污染 能 全部 导致 问题。

- 如果 必要时 弃去 的 果蝇 和 清洁 的 实验区 再次。 如果 一个 气味分子 污染 是 疑似， 替换 全部 的 管路 继续 重复 的 对照 测试 与 新 队列 直到 的 动物 展示 无 偏好 用于 任何 的 的 四 象限 然后， 连接 的 测试 气味分子 腔室 至 的 设置 使用 a 三通 阀门， 或 重新连接 的 导管 和 运行 a 测试 实验 用于 5 至 10 分钟 对于 更长 实验的 记录， 快速地 停止 和 重新开始 的 追踪 程序 每个 20 分钟， 或 的 数据 文件 将 是 太 大

在……之间 测试， 弃去 的 果蝇， 清洁 的 实验区 和 玻璃 培养皿 与 70% 乙醇, 和 替换 的 连接器 管子。 保持 的 干燥 气流 进行中 至 持续地 冲洗 的 系统。 对于 效率, 它 是 良好 至 有 二 嗅觉室 因此 清洁 能 是 完成 在……期间 运行。

- 如果 若干 实验 是 运行 开启 的 相同 天 支付 极端 护理 至 确保 那 无 气味 是 左侧 在 的 系统 来自 a 上一步 运行。 这 是 通常 不 a 问题 与 低 浓度 的 气味分子 或 与 CO2 但 用于 高度 浓缩的 刺激物， 向上 至 a 24小时 间隔 之间 实验 运行 可能 是 需要。