JoVE 实验百科全书
生物学
0 次观看 • 4:28 分钟 • April 30th, 2023
- A Y迷宫 由……组成 的 a Y形 连接器 与 三 果蝇 小瓶 连接的 到 它 由 直的 或 锥形的 管 果蝇 移动 通过 的 迷宫 朝向 的 侧面 与 的 刺激 那 他们 首选。 至 开始 的 实验, 位置 a 组织 纸 与 的 溶液 含有 的 挥发性 化学品 进入 每个 小瓶 然后, 连接 它们 到 的 逐渐变细的 管 这 逐渐变细的 管 限制 的 能力 的 的 果蝇 到 返回 到 的 中心 的 的 迷宫 和 减缓 的 扩散 的 的 挥发性 化学品
接下来, 冷却 饥饿处理 果蝇 到 缓慢 它们 下 做 不 使用 化学 麻醉 作为 这 可能 影响 的 结果 的 的 检测 快速地 连接 的 小瓶 与 的 冷藏的 果蝇 到 的 最终 侧面 的 的 迷宫 离开 的 果蝇 到 探索 的 迷宫 至 减少 任何 偏好 导致 由 明亮的 光 携带 出 这 步骤 在……下方 远红 光 哪一个 果蝇 做 不 见。 最后, 计数 的 果蝇 开启 每个 侧面 的 的 迷宫 他们的 位置 在 的 迷宫 表示 他们的 偏好 朝向 那 挥发性 化学 气味
在 的 示例 方案 我们 将 见 a 设置 的 的 Y迷宫 检测 与 野生 类型 果蝇
- 之前 进行 的 检测 的 随后 早上好, 在 的 结束 的 的 天, 转移 队列 的 10 到 20 实验的 线条 到 玻璃 小瓶 与 水分 提供 从 a 湿润 毛巾 的 果蝇 必须 是 测试 在 16 到 18 小时, 或 他们 可以 死亡 由于 到 干燥 或 饥饿 的 下一步 天, 组装 的 Y迷宫 开始 由 连接 的 Y形 连接器 到 二 玻璃 小瓶 使用 泡沫 连接器 与 修剪 移液器 提示 哪一个 制备 的 导管 他们的 逐渐变细 形状 使 这些 单向 传代。
该 第三 分支 的 的 Y 是 附件 到 a 加载中 管 制成 从 的 大 部分 的 a 移液器 尖端 和 允许 传代 从 的 加载中 小瓶 到 的 选择点 的 的 迷宫 超越 每个 逐渐变细 隧道 是 a 玻璃 小瓶 一 的 哪一个 必须 是 已加载 与 一个 气味分子 加载 这些 作为 40微升 团注 浸泡 进入 28毫米 方格 的 组织 纸张 哪一个 的 的 二 含有 的 气味分子 应该 替代的 随机地。
至 进行 的 测试, 首先 冷却 的 果蝇 开启 冰 简而言之, 因此 的 果蝇 是 减缓 向下 这 应该 是 下 远红 光 从 LED 鳞茎 和 在 25 度 摄氏度 轻柔地 滴 的 队列 的 果蝇 进入 的 加载中 小瓶 和 加载 的 Y迷宫 与 的 测试 果蝇。 做 不 使用 气体 麻醉
- 它 是 真的 关键的 到 转移 的 果蝇 到 的 加载中 小瓶 两者 迅速地 和 轻柔地。 它 是 实际上 的 大多数 困难 步骤 的 这个 实验 因为 果蝇 必须 清醒 向上 快速地 之前 的 扩散 的 气味 在 Y型迷宫
- 这 果蝇 应该 是 允许 到 探索 的 迷宫 用于 24 小时, 因此 a 最大值 数量 的 果蝇 移动 到 一 或 的 其他 玻璃 小瓶 这 数量 的 果蝇 当前 在 的 不同 管 提供 到 计算 的 嗅觉 索引 标准 统计学的 方法 应该 是 应用 到 这 值, 收集 从 的 行为 的 向上 到 10 果蝇。
如果 10只果蝇 的群体 无法 获得 稳定 的 结果, 可 改用 20只果蝇 的群体 进行 实验。 为 清洁 迷宫 的 组件, 将 其 拆解后 在 RBS 35 MD 溶液中浸泡过夜。 随后 用 自来水 冲洗 数次, 再 用 去离子水 进行 最终 冲洗, 然后 在 空气 中自然干燥。