活体显微注射 果蝇 胚胎:向发育中胚胎早期递送试剂

0 次观看 • 5:51 分钟 • April 30th, 2023

- 收集 活体 果蝇 胚胎 和 移除 他们的 不透明 绒毛膜 然后, 到……上 a 玻璃 盖玻片, 应用 a 线 的 庚烷 胶水, 哪个 是 胶带 粘合剂 溶解 在 液体 庚烷 为了 是 能够 到 手柄 的 现在 去卵膜的 胚胎, 仔细地 对齐 的 样本 在 a 行 到……上 的 粘合剂。

转移 的 盖玻片 进入 a 脱水 腔室 到 部分地 干燥 的 胚胎 这 将 防止 细胞质的 泄漏 在……期间 或 之后 注射 接下来, 移除 的 盖玻片 和 盖子 的 胚胎 与 卤代烃 油 到 防止 进一步 脱水 而 仍然 允许 氧气 至 弥散 进入 的 胚胎

至 执行 的 显微注射 使用 a 显微注射 系统 开启 a 兼容的 显微镜 由 观察 通过 的 眼睛 片段, 识别 两者 的 胚胎 和 的 针 预载 与 注射 溶液 断裂 开放 的 针 和 确保 那 它 产生 一致的 和 大小合适的 液体 滴 然后, 带来 的 针 内部 的 胚胎 和 注射 的 适当的 体积 带来 出 的 针, 和 继续 到 的 下一步 一, 重复 的 注射 用于 的 剩余 胚胎

在 本 示例 方案中,我们将看到一Drosophila胚胎微注射技术的演示,用于细胞分裂的活体成像研究。

- 之前 设置 向上 的 盖玻片, 制作 庚烷 胶水 由 展开 双面粘性 胶带, 和 放置 它 在 a 100 毫升 瓶 添加 关于 50 毫升 的 庚烷, 密封 的 瓶 和 摇动它 用于 多个 天。

之前 准备 的 胚胎, 制作 a 脱水 腔室 那个 的 胚胎 将 是 放置 在 之前 到 注射 为了 做 此, 放置 一 部分 的 a 35 毫米 培养皿 内部 的 a 100 毫米 佩特里 培养皿 到 制作 a 表格 添加 干燥剂, 哪个 是 无水的 钙 硫酸盐, 大约 它 因此 那 的 高度 的 的 Drierite 是 无 较高 比 的 表格 和 盖子

至 开始 准备 的 胚胎, 首先 收集 它们 从 的 放置 笼 由 改变 的 葡萄 果汁 培养皿 与 酵母 每个 小时 该 胚胎 应该 是 成像 关于 二 小时 之后 的 开始 的 的 收集 至 准备 的 盖玻片 位置 它 在 一 侧面 的 a 显微镜 载玻片 和 胶带 的 四 角落 下调 因此 它 不 移动。

使用 a 棉签式 施用器, 放置 一 层 的 庚烷 胶水 在 a 线 在 的 盖玻片 的 胶水 应该 不 是 黏性 和 应该 干燥 在 a 少数 秒 如果 它 是 也 厚的 添加 更多 庚烷

最后, 放置 a 块 的 双面粘性 胶带 在 的 载玻片 下一步 到 的 盖玻片 随着 a 湿润的 刷子, 仔细地 挑选 向上 这 胚胎 从 的 葡萄 果汁 培养皿 和 位置 它们 开启 的 双面粘性 胶带 开启 的 载玻片

接下来, 使用 一 一半 的 a 镊子 到 滚

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