幼虫环腺解剖：从Drosophila中分离发育性内分泌器官

- 至 解剖 的 环 腺体, 你 将 需要 a 解剖 显微镜, 二 镊子 a 精细 量规 针 到 用于 作为 a 解剖 刀具, 和 a 缓冲的 溶液 查找 的 环 腺体 由 识别 的 头部 的 的 幼虫, 哪个 含有 的 口 钩子 旅行 沿 的 长度 的 的 幼虫 到 找到 的 脑, 哪个 是 之间 的 胸部 和 的 腹部 切片。 这 环 腺体 是 较小的 比 的 脑 和 是 位于 开启 顶部

的 幼虫 环 腺体 是 a 复合物 内分泌 结构 那 含有 三 不同 内分泌 器官。 的 躯体 咽侧体 位于 在 的 中心 的 的 环 腺体 和 产生 幼体 激素， 哪个 调节 发育 和 衰老 的 前胸 腺体 包围 的 躯干 allatum 和 使得 上 的 大多数 的 的 结构 蜕皮激素， a 激素 参与 在 昆虫 麦芽制造， 是 制成 由 这 腺体 下方 的 前胸 腺体 是 的 躯体 心脏的 其 产生 脂动激素 激素， a 营养物质 调节因子。

在 本 示例中，我 将 解剖 幼虫 脑 和 环 腺 以 进行免疫组织化学分析。

- 之后 准备 的 幼虫, 开始 的 课程 解剖 在 a 三厘米 培养皿 已填满 与 PBS 在……下方 a 解剖 显微镜 首先， 握力 的 口 钩 与 镊子 然后， 使用 微 剪刀, 切断 的 身体 在 关于 a 第三 的 的 长度 从 的 前部 尖端 接下来， 保持 的 前部 长度 与 一 配对 的 镊子 和 使用 a 第二 配对 到 轻柔地 推 的 尖端 的 的 头部 进入 的 身体 到 最终 转动 的 幼虫 身体 内部 出。

准备 上 到 20 幼虫 在 这 方式 在……之内 10 分钟 和 然后 转移 它们 进入 固定剂 溶液 之后 30 分钟 洗涤 的 制备 和 继续 与 免疫染色 之后 免疫染色 的 幼虫， 使用 a 一次性 移液器 到 转移 的 样本 到 a 培养皿 已填满 与 0.3% PBT

下方 a 解剖 显微镜, 握力 的 角质层 或 口 钩 与 一 配对 的 镊子 然后， 使用 a 27-gauge 针 附件 到 a 1 毫升 注射器 像 a 刀 到 移除 的 脑-环腺-眼盘 复合物 从 的 身体 角质层 由 切割 远离 的 前部 尖端 的 的 食管 和 眼睛 圆盘

接下来， 使用 镊子 仔细地 分离 的 食管 和 肠道 从 的 脑-环腺-眼盘 复合物。 拉 的 肠道 出 到 的 后部 侧面 因为 的 食管 通过 通过 的 脑 上方 的 腹侧 神经 脊髓 最后， 到 分离 的 脑环 腺体 复合物， 仔细地 切割 的 连接 之间 的 脑 圆盘 眼睛 圆盘， 和 腿 圆盘 与 a 针 刀具

- 它 是 相当 必需的 到 使用 精细 镊子 与 锋利的 边缘 在……期间 解剖 I 也 强烈地 推荐 那 你 锐化 镊子 与 阿肯色州 研磨 石头 至 带来 它们的 边缘 一起 无 任何 缺口

- 至 转移 的 样本， 使用 a 微量移液器 与 a 宽视野 钻孔 尖端 沉积 的 样本 到……上 的 中心 的 的 玻璃 载玻片 然后， 使用 镊子 至 位置 的 样本 到 他们的 腹侧 侧面 因此 的 环 腺体， 哪个 是 位于 开启 的 背侧 侧面 的 的 脑 能 是 成像。 接下来， 倾斜 的 载玻片 和 擦拭 关闭 作为 大量 的 的 过量 PBT 作为 尽可能。 然后， 放置 a 滴 的 封片 试剂 接近 的 样本 和 使用 镊子 到 缓慢地 下部 a 盖玻片 结束 的 试剂， 和 然后 结束 的 样本。