局部热探针检测法：一种评估对高温伤害性感受的方法 果蝇 幼虫

- 准备 果蝇 Drosophila 幼虫 进行 热探针 检测 时 ， 收集 所需 发育 阶段 的 个体 ， 并将 单个 幼虫 转移 至 含有 一层 薄水膜 的 测试 培养皿 上 。 水膜 可 使 幼虫 自由 移动 ， 而 不会 粘附 在 培养皿 表面 上 。

Drosophila 幼虫 通过 表皮中 的 多树突 感觉 神经元 来 感知 有害的 热 刺激 ，这些 神经元 被称为 伤害性感受器。 它们 只有在 达到 一定 感觉 阈值时 才 会 产生 放电 ，例如 可能 造成 损伤的高温。

设置 的 热 探针 到 a 温度 那 将 克服 这 感觉 阈值， 和 导致 的 伤害性感受器 到 火 轻柔地 按压 的 提示 的 的 探针 对抗 的 幼虫 到 应用 热 该 幼虫 将 响应 到 的 有害的 温度 与 热伤害性感受 行为 撤回 从 的 探针 停止 当 的 幼虫 表现出 a 360度 角色 远离 从 的 热 探针， 或 当 a 定义的 时间 有 已过去的时间。 记录 的 反应 时间

在 本 示例 方案中，我 将 展示 一 种 针 对 早期 三 龄 期 的 黑 腹 果 Drosophila 幼虫的局部热探针检测方法。

- 首先，将 热 探针 的 温度 预设 至 所需 的 设定值。设定 完成后，使用 毛刷 或 镊子 将 一 只 幼虫 轻轻 转移 至 一 个 平坦 的 平台 上，并 确保 幼虫 表面 覆盖 一 层 薄 水 膜。

- 在 顺序 到 最小化 的 变异 在 压力， 作为 良好 作为 到 确保 的 正确 位置 和 角度 的 的 热 探针， 练习 使 完美。

- 轻柔地 按压 的 探针 尖端 对抗 的 幼虫 在 片段 A4, 应用 光 压力 与 的 尖端 在 关于 a 45度 角度 介于 的 探针 和 的 表面 的 的 幼虫 的 压力 应该 导致 a 轻微 压痕 在 的 表面 的 幼虫， 和 将 通常 是 充足 到 防止 运动。 继续 刺激 的 幼虫 直到 a 撤回 反应 是 表现出 或 直到 的 20秒 截断值 是 达到。

响应 幼虫 通常 首先 显示 a 初步的 行为 的 抬起 的 头部 和 尾 随后 由 的 撤回 行为 的 滚动 在 最少 360 度 一旦 的 撤回 行为 是 启动， 释放 接触 与 的 探针， 和 记录 的 潜伏期, 或 时间 取样 到 撤回 如果 无 撤回 行为 是 观察到 在……之内 20 秒, 然后 的 幼虫 是 a 无应答者