成年果蝇中肠解剖：一种消化道分离方法

- 为了 开始， 移除 的 头部 从 一个 麻醉的 成年 果蝇 封面 的 断头 果蝇 与 a 溶液 含有 磷酸盐缓冲液 生理盐水 或 PBS 和 牛 血清 白蛋白， 或 BSA, 到 避免 干燥 保持 这 果蝇 由 的 胸部 与 镊子 和 然后 拉 的 腹部 与 a 第二 配对 的 镊子 到 暴露 的 肠道 由于 的 作物 或 的 食物 储存 袋 将 是 已附上 到 的 胸部 轻柔地 拉 的 肠道 远离 从 的 胸部

一旦 分离的， 拉 的 裁剪 远离 从 的 腹部 到 展开 的 肠道 拉 关闭 的 后部 结束 的 的 果蝇 到 开始 至 自由 的 肠道 从 的 腹部 腔 继续 拖拽 的 肠道 到 拉 的 整个 组织 出 的 的 腹部 一旦 游离的， 移除 这 前肠， 马氏管 小管， 后肠， 和 卵巢 到 离开 在……后面 仅 的 解剖分离的 中肠， 的 初级 位点 的 消化 在……之内 的 果蝇

在 的 示例 方案 我们 将 解剖 中肠 从 年轻 和 老的 成年 果蝇 到 是 分析 进一步 通过 荧光激活 细胞 分选， 或 FACS

- 之前 开始 的 解剖 麻醉 一 小瓶 的 40 果蝇 与 碳 二氧化物 在 a 标准 果蝇 床 然后 使用 a 剃刀 刀片 到 断头 全部 的 的 果蝇 和 转移 它们 到 a 解剖 培养皿 包被 与 琼脂糖 凝胶 倒入 足够 冷 PBS 加 BSA 进入 的 培养皿 到 覆盖 的 琼脂糖 The 果蝇 将 漂浮

然后， 依次 对每只 昆虫 用 一把 镊子 夹住 蝇的 腹部 ， 另 一把 镊子 夹住 其 胸 部 。将 胸部 与 腹部 分离 。此 时 肠道 将 暴露 可 见 ， 而 嗉囊 很可能 仍 与 胸部 相 连 。用 镊子 夹住 肠道 ， 并 将其 从 胸部 中 拉出 。然 后 ， 夹住 嗉囊 ， 将 肠道 向 前 稍 微 拉 离 腹部 ， 以 将其 展开 。

接下来， 使用 一 的 的 镊子 到 抓取 的 后部 结束 的 的 腹部, 和 的 其他 到 抓握 的 边缘 的 的 前方 开放 角质层 拉 的 后部 结束 远离 到 中断 的 角质层， 和 继续 拉取 后方 非常 轻柔地， 直到 的 整个 肠道 具有 已经 拉出 出 的 的 腹部 腔 移除 的 前肠， 马氏管 管子， 后肠， 和 卵巢， 离开 的 裸 中肠

作为 的 中肠 是 分离的， 使用 a 玻璃 巴斯德 移液器 到 定期地 转移 若干 的 的 肠道 组织 在 a 时间 到 a 1.5毫升 微型离心机 管 含有 冷 PBS 加 BSA 在 冰