制备 果蝇 心脏：一种研究成年果蝇心脏生理学的技术

- 不同 比 在脊椎动物中， 的 果蝇 心脏 是 部分 的 一个 开放 循环的 系统。 的 心脏 的 一个 成年 果蝇 是 a 管状 结构 构建 从 心肌细胞 那 是 连接的 到 的 表皮 由 翅脉 肌肉 和 嵌入的 在 细胞外 基质 的 心脏 腔室 是 开启 的 后部 结束 的 的 果蝇 和 泵 血淋巴 进入 的 主动脉 从 哪个 它 流 进入 的 开放 身体 腔

在 昆虫， 的 血淋巴 起作用 作为 两者 血液 和 间质的 液体 携带 营养素, 信号转导 分子, 和 免疫 细胞 附加的 解剖标志 的 的 心脏 包括 口 哪个 是 开口 沿着 的 管 和 心内 瓣膜。 心包 细胞 是 局部的 沿 的 心脏 管 和 是 部分 的 的 果蝇的 排泄的 系统。

在 一个 实验的 心脏 制备 的 人工的 血淋巴 模拟物 生理的 条件 至 保存 组织 功能。 尽管 天然的 血淋巴 是 不 负责任的 用于 气体 交换, 的 人工 血淋巴 必须 是 良好 含氧的 到 替代 用于 的 缺乏 的 a 功能的 气管 系统。 在 的 随后 实验, 我们 演示 a 半完整 心脏 制备 来自 一个 成年 果蝇 用于 活体 成像 或 电生理学

- 之前 获取 开始， 我们 第一 准备 一个 人工 血淋巴 溶液 这 溶液 包含 蔗糖 和 海藻糖, 哪个 应该 是 添加 到 的 人工 血淋巴 从 冷藏的 储备液 溶液 仅 之前 到 使用 在 顺序 至 防止 细菌 污染。 带入 的 人工 血淋巴 到 室 温度 和 氧合 的 溶液 由 空气 冒泡 用于 在 最少 15 分钟

接下来， 使用标准移液管拉制仪 拉 制 若 干 细 微 的 毛细 管 ， 以 备 后 续 在 果 蝇 中 去 除脂肪体时使用。

一旦 所有内容 有 已经 制备 成年 果蝇 必须 是 麻醉。 这 能 是 完成 使用 简要 暴露 到 果蝇 小睡 用于 二 到 五 分钟 但 是 仔细的 不 到 离开 的 果蝇 在 的 果蝇 小睡 更长 比 五 分钟 短期 暴露 到 冷 能 也 是 使用 至 麻醉 果蝇， 但 碳 二氧化物 是 不 推荐 由于 它 有 持久的 效应 开启 心脏 速率 和 节律性。

接下来， 的 麻醉的 果蝇 是 放置， 背侧 侧面 下 进入 a 佩特里 培养皿 包被的 与 a 薄 层 的 石油 凝胶。 的 疏水的 角质层 在 的 翅 和 身体 应该 可逆地 棒状物 至 的 果冻， 但 的 果蝇 能 是 重新定位 如果 需要。 一个 初始 切割 是 制成 使用 a 弯曲的 配对 的 弹簧 剪刀。 这 是 完成 由 放置 的 剪刀 刀片 在……下方 的 腿 的 的 果蝇 和 倾斜的 向下 朝向 的 背侧 表面 的 的 胸部 接近 的 颈部

该 头部 腹侧 神经 脐带， 和 腿 是 已移除 与 a 单个 切。 一旦 切割， 的 制备 是 然后 浸没的 在 的 含氧的 人工 血淋巴 溶液 使用 弹簧 剪刀, 的 后部 尖端 的 的 腹部， 哪个 是 由……组成 的 腹部 片段 7 和 8, 是 已移除 与 a 单个 切。 这 提供 获取 用于 制作 侧向 切口 沿着 两者 边缘 的 的 腹部 和 起作用 到 切断 的 连接 介于 的 后部 肠道 和 的 腹部 角质层

插入 的 刀片 的 的 剪刀 进入 的 小 开启 在 的 尖端 的 的 腹部 和 切割 的 角质层 侧向。 这 自由的 向上 一 边缘 的 的 腹侧 角质层 抓握 的 瓣 与 镊子 和 制作 a 相似的 切割 沿 的 相反 侧向 边缘 的 的 腹部 这 释放 瓣膜 的 腹侧 腹部 角质层 可以 现在 是 已移除。

的 肠道 和 其他 腹部 器官 能 通常 是 已移除 作为 a 单个 质量 使用 珠宝商 镊子 和 温和的 拉扯。 移除 的 内部 器官 揭示 的 跳动 心脏 管 其 是 仍然 已附上 到 的 背侧 角质层 由 小 翅脉 肌肉 和 是 被包围 由 脂肪 细胞器 的 拉出 毛细血管 是 插入 进入 塑料， 1/16英寸 管路 附件 至 a 真空 源 该 抽吸 力 是 成比例的 至 尖端 直径 因此 移液器 与 提示 较大 比 40 微米 在 直径 应该 不 是 使用。

一旦 设置 向上 这 抽吸 系统 是 使用 到 吸取 关闭 过量 脂肪 从 大约 的 心脏 管 它 能 也 是 使用 到 移除 空气 气泡 那 积累 大约 的 角质层 和 任何 碎片 极端 护理 必须 是 采集 到 避免 接触 的 心脏 其自身 和 因为 的 后部 部分 的 的 心脏 是 非常 脆弱的， 那 区域 应该 是 避免 总共。 的 成年 果蝇 心脏 管 是 现在 暴露 和 应该 是 搏动。

如果 必要时 的 角质层 和 已附上 心脏 能 是 重新定位 由 轻柔地 提升 的 角质层 出 的 的 石油 果冻 和 仔细地 压实 它 返回 下调 再次 避免 任何 接触 与 的 心脏 组织 在 这 点 的 溶液 沐浴 的 制备 应该 是 替换 与 新鲜的， 人工的 血淋巴 这 制备 应该 是 允许 到 平衡 用于 20 至 30 分钟 与 氧合 之前 到 任何 操作。 如果 的 制备 是 到 是 维持 用于 更长 比 60 分钟 它 应该 是 再灌注 与 新鲜 人工 血淋巴 这 制备 是 现在 准备就绪 到 是 使用 用于 光学 记录 和 能 也 是 使用 用于 电生理学的 记录 或 用于 组织学的 操作。