寿命分析：测量 C. elegans 的寿命

- 测量 的 平均值 寿命 的 a 线虫 种群， 开始 与 发育上 同步的 L1 幼虫 在 M9 缓冲液 确定 的 密度 的 的 幼虫， 然后 添加 50 到 每个 平板 准备 在 最少 三 重复 平板 每 条件， 作为 良好 作为 备份 平板

允许 这些 线虫 到 开发 通常 直到 他们 达到 的 L4 阶段 现在 你 可能 添加 FUdR 到 的 平板， 哪一个 将 防止 的 线虫 从 生产 子代 或者， 你 将 需要 到 移动 的 线虫 到 新 培养皿 每个 天 之后 计数 到 确保 你 是 仅 测量 的 寿命 的 a 单个 生成

接下来， 移除 任何 雄性 这 将 移除 的 变量 的 性别 和 交配 从 的 实验 的 下一步 天， 计数 的 数量 的 活体 线虫 在 的 板 由 观察 用于 自发的 运动 或 反应 到 温和的 触碰 移除 任何 死亡的 线虫 和 记录 的 数字。 计数 存活 线虫 每日 直到 无 保留。 在 的 示例 方案， 我们 将 见 a 演示 的 a 寿命 检测

- 加载 的 制备 接种细菌的 培养皿 与 50 L1 动物 每个。 设置 向上 的 培养皿 在 a 20 度 摄氏度 培养箱 直到 的 胚胎 开发 到 的 L4 阶段 正常 发育 从 L1 到 L4 需要 关于 40 小时

然后， 到 防止 子代 生产， 添加 160 微升 的 50x FUdR 到 每个 平板 然后 移除 的 雄性 作为 寿命 是 通常 测量 仅 与 雌雄同体 一旦 已完成 重新包装 的 培养皿 进入 的 20 摄氏度 摄氏度 培养箱

在所有线虫死亡之前，每天 对 其 存活 状态 进行 评 估。为 此，每日 操作 时，用 铂金丝 或 睫毛 轻轻 触碰 每只 不 移动 的 线虫 头 部。无 反应 的 个体 视为 死亡，并 须 从 培养皿 中 移除。在 此 常规 操作 中 应 记录 所有 异常 现象。