C. elegans 化感行为检测实验：一种用于检测线虫化学感应能力的方法

- 为了 制作 感觉 的 遇到 条件 和 响应 到 它们 相应地， 的 蠕虫 C. elegans 有， 在……之中 其他 a 高度 已开发 化学感受 系统 能够 到 检测 a 宽视野 品种 的 不同 化学品

感觉 神经元 在 的 头部， 的 双孔器 和 内层 唇的 神经元, 作为 良好 作为 神经元 在 的 尾 的 竹节虫 神经元, 是 或者 直接地 或 间接地 暴露 通过 的 角质层 到 的 外部 条件。 这些 化学感受 神经元 代码 相关 信息 使用 由 的 蠕虫 到 产生 一个 适当的 行为 响应 a 行为 称为 趋化性

至 测试 的 趋化性 反应 到 或者 挥发性 气味分子 或 味觉 水溶性 线索， 分离 线虫 的 的 期望的 发育的 阶段 和 暴露 他们 到 的 测试 化学 开启 a 此前 制备 实验的 竞技场 当 暴露的 到 有利的 化学品 像 那些 产生 由 a 细菌 食物 来源 C. elegans 显示 阳性 趋化性 朝向 的 源

相反地， 当 暴露 到 较少 有利的 或 有毒的 化学品 像 重 金属， 的 蠕虫 显示 阴性 趋化性 避免 的 化学物质 因此， 嗅觉 或 味觉 突变体 失败 到 避免 厌恶的 化学品 和 保持 在 不利的 条件 在 对比 到 野生 类型 动物 谁 避免 的 厌恶的 条件

在 本 示例 方案中，将 展示 一种 趋化性 实验 的 操作 过程，用于 检测 线虫 对 铜 的 回避反应。

- 之后 过夜 孵育， 移除 培养皿 从 的 培养箱 并使用 的 标记的 下表面 的 的 培养皿 作为 a 引导， 移液器 100 微升 的 新鲜的 制备 0.5 摩尔 铜 二 硫酸盐 溶液 开启 的 边缘 的 的 琼脂 到 创建 一个 外侧 铜 屏障 移液器 25 微升 的 的 铜 二 硫酸盐 溶液 到 创建 a 中线 屏障

确保 那个 的 copper 二 硫酸盐 溶液 是否 不 接触 的 细菌 贴片， 和 允许 的 铜 溶液 到 干燥 到……上 的 平板 检查 用于 干燥度 每个 五 分钟 之后 转移 与 a 实验室 组织 由 轻微地 轻拍 的 溶液 接近 的 边缘 的 的 培养皿 到 辨别

立即 之前 到 的 检测 转移 的 实验的 生物体 到 a 无菌 琼脂 培养皿 和 允许 的 线虫 到 移动 自由地 用于 一 分钟 到 移除 过量 细菌

接下来， 移液器 1 毫升 的 M9 到……上 的 培养皿 与 年轻 成虫 那 是 转移 24 小时 此前 在 顺序 至 洗涤 线虫 进入 a 微型离心机 管 离心 的 线虫 在 3,000 次 g 用于 一 分钟

蠕虫 应该 表格 a 沉淀物 在 的 底部 的 的 管 吸出 M9 溶液 无 破坏 的 蠕虫 沉淀物 添加 1 毫升 的 M9 溶液 到 的 蠕虫 沉淀物 倒置 管 到 混合 线虫 与 的 溶液

如果 过量 细菌 是 最初 转移 与 的 线虫， 重复 用于 a 总计 的 五 次 之后 的 最终 洗涤， 吸出 的 上清液 直到 100 微升 的 M9 溶液 和 的 蠕虫 沉淀物 残留物 立即 转移 线虫 从 溶液 一次 的 洗涤 步骤 有 已经 完成。

移液器 20 微升 的 的 线虫 沉淀物 从 的 底部 的 的 管 到……上 的 无菌 一半 的 的 检测 平板 确保 那 10 线虫 是 转移 到 的 检测 培养皿 和 那 无 污染的 食物 是 存在 无 细菌 应该 是 转移 到 的 铜 食物 种族 平板

移除 过量 M9 溶液 从 的 线虫 与 a 实验室 组织 在……之内 一 分钟 确保 这 M9 溶液 是否 不 接触 到 的 copper 二 硫酸盐 溶液， 和 那 的 线虫 和 琼脂 表面 保持 完整 弃去 线虫 那 有 意外地 已经 已移除 与 的 实验室 组织

一旦 的 M9 溶液 有 已经 已移除 和 全部 线虫 有 开始 非液体 运动能力 模式， 即 当 他们 有 停止 剧烈摆动， 开始 的 检测 秒表 如果 额外 线虫 是 意外地 包括， 移除 它们 由 挑选 与 卤代烃 油 到 确保 那 无 细菌 是 添加 到 的 平板

每30分钟 检查一次 检测板 每 30 分钟 对于含有细菌菌斑的检测板 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 对于阴性对照板 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 对于阴性对照板 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 对于阴性对照板 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 对于阴性对照板 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 对于阴性对照板 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 若生物体跨越了屏障 则判为阳性 若生物体在四小时内到达食物菌斑区域 则判为阳性 若生物体跨越了屏障 则判为阳性