JoVE 实验百科全书
生物学
0 次观看 • 3:22 分钟 • April 30th, 2023
- 无 感觉 刺激, C. elegans 运动 是 通常 正向 和 是 中断的 由 反转 和 转折点—— 随机 重新定位 操作步骤 那 结果 在 a 改变 的 方向。 C. elegans 是 电感受的 那 是, 他们 能 感觉 电 领域。 当 暴露 至 a 温和的 直接 电流 或 直流电 线虫 移动 在 a 直的 不间断的 路径 在 的 方向 的 的 阴性 电极 或 阴极, a 行为 称为 电趋性
为了 更多 准确地 观察 的 蠕虫的 运动能力 位置 的 动物 在 a 微流控 设备 和 应用 a 直流 电 领域 反转 的 方向 的 的 领域 和 的 蠕虫 将 转动 的 相反 方式-- 朝向 的 方向 的 的 阴极 应用 一个 交替 电流 交流电 和 的 蠕虫 将 停止。 该 交替 改变 在 的 菲尔德的 方向 压倒 的 线虫的 神经运动 系统 导致 在 的 蠕虫的 固定化 重新应用 的 直流 领域 和 的 蠕虫 将 继续 正向 运动 朝向 的 阴极
在 以下 示例 方案 中,我们 将 观察 一种 装置,用于 在 微流控 装置 中 展示 电趋性 检测。
- 开始 这 步骤 由 放置 的 仅 组装 微通道 到……上 一个 xy- 可移动的 阶段 的 a 显微镜 与 a 安装 相机 连接的 到 a 监测器 连接 的 功率 供应 到 的 微通道的 电极
之后 确认 那 的 电阻 的 的 微通道 是 左右 0.6 兆欧姆 连接 的 输出 管 的 的 微通道 到 a 一次性 注射器 然后 浸没 的 口 的 的 入口 管 进入 a 溶液 的 线虫 悬浮 在 M9 生理的 缓冲液 应用 阴性 压力 内部 的 注射器 到 吸出 液体 进入 的 通道
当 的 入口 和 出口 管 是 两者 已填充, 断开连接 的 注射器 和 静水压地 操作 的 流 由 调整 的 管的 相对的 高度 到 位置 a 蠕虫 在 的 中心 的 的 通道 然后 放置 两者 管 扁平 在 的 相同 升高 至 维持 零 流 内部 的 微通道 当 切换 线虫 样本 在……期间 一个 电趋性 实验, 之后 调平 两者 的 入口 管子到 的 相同 升高 如果 那里 是 仍然 流 制作 小 调整 到 的 管的 高度 相对的 到 每个 其他。
- 如果 我们 是 永远 不确定 的 是否 的 流 是 真的 零 我们 能 诱导 a 逆转 在 的 蠕虫的 运动 由 改变 的 极性 的 的 电 领域 和 然后 评估 的 蠕虫的 线性的 速度 作为 它 翻转 周围。
- 现在, 设置 的 功率 供应 到 的 适当的 电压 激活 的 电 信号, 和 允许 一 分钟 的 暴露前 用于 的 蠕虫 到 适应环境 到 的 领域 在……期间 哪个 时间 的 蠕虫 应该 开始 移动 朝向 的 阴极 当 的 分钟 有 通过 开始 记录
当 的 实验 是 完成, 移除 全部 的 液体 和 线虫 从 的 通道 冲洗 的 腔室 与 去离子 水 和 离开 的 设备 开启 a 热 培养皿 在 125 度 摄氏度 到 干燥。