C. elegans 运动追踪：一种评估线虫运动能力的方法

- 为了 评估 运动 在 C. 秀丽隐杆线虫, 使用 a 相机 到 记录 的 蠕虫 运动 开启 一个 琼脂 平板， 确保 即使 照明 的 的 培养皿 在……期间 的 记录 至 限制 的 线虫的 运动 左右 的 平板， 使用 铜 环 铜 是 厌恶的 到 C. 秀丽隐杆线虫, 因此 线虫 是 圈禁 在……之内 的 环状结构。

放置 若干 铜 环 到……上 一 培养皿 到 同时 追踪 线虫 在 每个 环 这 允许 的 评估 的 对照 和 实验的 动物 到 是 执行 在……下方 相同的 条件， 减少 天 至 天 变异性 和 允许 用于 侧面 由 侧面 比较 记录 的 蠕虫 运动 结束 设置 时间 间隔， 和 使用 计算机 软件 至 分析 特征 的 的 运动的 行为 如此 作为 的 速度 的 运动 和 距离 移动的距离。

在 的 示例 方案 我们 将 见 a 演示 的 a 运动 追踪 检测 测试 的 效应 的 酒精 在 的 蠕虫的 运动 速度

- 至 开始， 取 二 分钟 或 较少 到 转移 10 线虫 从 每个 实验的 组 到 的 中心 的 a 铜 环 在 一个 驯化 平板 这 是 a 培养皿 与 无 乙醇 避免 转移 食物 与 的 线虫 作为 它 将 减少 他们的 运动 此外 避免 有害的 的 琼脂 表面 因为 的 线虫 将 洞穴 记录 的 时间 的 加载中 到……上 的 平板， 和 是 当然 到 交错排列 的 转移 的 线虫 到 每个 培养皿 由 结束 二 分钟， 因此 每个 培养皿 可以 是 拍摄 单独地 在 的 适当的 时间 间隔。

让 每个 驯化 平板 孵育 在 室 温度 用于 30 分钟 然后， 转移 的 线虫 到 的 检测 平板， 随后 的 顺序 使用 到 位置 的 线虫 在 的 驯化 平板 使用 a 薄边 扁平化 蠕虫 挑选 无 细菌， 收集 的 线虫 开启 顶部 的 的 扁平化 挑选 使用 a 舀取 运动 然后， 密封 的 培养皿 与 实验室 薄膜 到 最小化 损失 的 乙醇 到 汽化

- 的 速度 在 哪个 的 动物 是 转移 在 这 步骤 是 非常 重要， 因为 的 转移 动物 将 是 暴露 到 乙醇 更长。 所以 它 是 a 良好 想法 至 旋转 哪个 菌株 是 放置 开启 的 平板 首先 跨越 实验的 重复组

- A 显微镜 与 高 分辨率 视频 相机 是 必需的 至 薄膜 的 线虫 现在。 即使 照明， 如此 作为 从 a 三英寸 方形 背光 是 重要的 用于 的 分析。 然后， 至 维持 对比， 图像 的 培养皿 培养基 侧面 上

准备 的 图像 分析 软件 到 捕获 120 帧， 12位， 灰度 延时 视频 在 一 帧 每 第二。 为了 减少 的 大小 的 的 输出 文件 而 仍然 保留 充足 图像 分辨率 使用 a 二乘二 分箱 模