斑马鱼避免和硫化物分析：一种高通量方法，以检查拉瓦尔行为，以响应逆向视觉刺激

- 首先，将 5 只幼虫放在 6 泳道琼脂糖板的每个泳道中。添加额外的鸡蛋水，但不要将泳道装得太满。蛋水中含有亚甲蓝，可防止霉菌生长。让幼虫适应至少 10 分钟以减轻压力。

现在将孔板放在笔记本电脑屏幕上的成像室中。将相机对准孔板。用鸡蛋水完全填充泳道。

接下来，通过拍摄延时图像来记录放置在空白背景上的幼虫的行为。在笔记本电脑屏幕上显示一个移动的红色条，并响应移动的红色条拍摄幼虫的延时图像。

红色形状被视为威胁、厌恶刺激，并导致幼虫应激。作为回应，他们避开了杠铃并表现出积极的触觉倾向。正触觉是鱼对寻求与墙壁接触并在泳道边缘游泳的刺激的反应。

在示例方案中，我们将分析用药物化合物或环境毒素处理的斑马鱼幼虫的回避和趋变反应。

- 要开始图像捕获，请小心地将幼虫从培养皿移动到琼脂糖泳道，以帮助减少幼虫应激。每个泳道最多可以放置 20 只幼虫，但通常每个泳道使用 5 只幼虫，以促进最准确地跟踪游泳速度并减少每次实验所需的幼虫数量。

实验，用含或不含药物或毒物的蛋水填充泳道。在将通道放入成像柜之前，不要完全填满通道，以防止溢出。让幼虫适应 10 分钟。适应期过后，用手将四个板直接放在笔记本电脑屏幕上。

此时，可以用鸡蛋水或化学处理对泳道进行加注，使其与泳道顶部齐平，以消除图像中泳道边缘的阴影。

对计算机进行延时摄影编程，每 6 秒拍摄一次照片，每次实验总共 300 张图像。将相机设置为较低的分辨率，以便以视频速度进行成像。虽然较低的分辨率将记录限制在单个多孔板中，但视频记录适用于对快速游泳事件进行成像。

使用 PowerPoint 演示文稿作为幼虫的厌恶刺激。在此演示中，PowerPoint 从空白白色背景开始 15 分钟，然后是印版上半部分移动的红色条形 15 分钟。为避免琼脂糖泳道内的液体蒸发，请将最大成像时间保持在 1 小时以下。