全细胞膜片钳电生理学：一种研究神经元电学特性的方法

- 开始 由 放置 a 记录 腔室 含有 a 样本 在 a 浴液 溶液, 其 组成 匹配项 的 生理的 细胞外 环境 或 的 细胞质, 到……上 a 显微镜 阶段 推进 的 记录 微量移液器 a 移液器 含有 a 银 电极 浸泡 在 一个 电解质 溶液， 哪个 模拟物 的 细胞内 条件， 朝向 的 神经元 由 应用 阳性 压力， 和 制备 接触 与 的 细胞 膜

轻柔地 开关 从 阳性 到 阴性 压力 到 表格 a 紧密 密封 之间 的 膜 和 的 移液器 设置 a 保持 潜力 在 的 放大器 到 维持 的 细胞 在 a 恒定的 电压 然后 破裂 的 细胞 膜 在……之内 的 微量移液器 由 应用 抽吸

一旦 的 细胞 膜 破裂， 的 持握 潜力 导致 的 流 的 离子 通过 电压门控 离子 通道， 创建 a 膜 电位 哪个 是 记录 由 的 记录 电极 立即 记录 的 膜 潜力 这 记录 电极 传递 的 信号 到 的 反馈 放大器， 哪个 减去 的 膜 潜力 来自 的 持握 潜能-- 一个 示波器, 哪个 呈现 a 视觉 显示 的 的 膜 电位 和 a 计算机 在 的 随后 方案 我们 将 执行 a 贴片 夹钳 测量 开启 的 Mauthner 细胞 在 a 斑马鱼 胚胎

- 进行 膜片钳 实验 前，首先 使 用 薄 壁 硼 硅 酸 盐 玻 璃 毛 细 管 在 水 平 拉 制 仪 上 拉 制 一 些 膜 片 钳 制 电 极。经 火 抛 光 使 尖 端 形 成 光滑边缘后，电极尖端直径约为 0.2 至 0.4 微米，柄部锥形部分长度约为 4 毫米。

填充 的 移液器 尖端 与 细胞内 溶液 由 浸渍 的 尖端 进入 的 细胞内 液体 然后 插入 a 注射器 针 进入 的 移液器 和 轻柔地 排出 细胞内 溶液 从 的 注射器 至 完成 填充 的 移液器 连接 的 移液器 到 的 放大器 头部 阶段 在 的 电生理学 设置 它 是 重要 到 保持 的 头部 阶段 在 a 大致 45 度 角度 到 的 水平的 轴, 作为 这 确保 一个 进入 角度 用于 的 移液器 那 是 合适的 用于 的 形成 的 高 电阻 密封件 与 的 毛特纳 细胞

右侧 之前 的 移液器 降低 进入 的 浴液 溶液， 应用 a 小 量 的 阳性 压力 到 的 移液器 至 减少 的 机会 的 的 尖端 封闭。 继续 到 方法 M细胞与 a 小 量 的 阳性 压力 在 的 移液器 的 阳性 压力 轻柔地 推动 的 细胞 来自 侧面 到 侧面 和 当 定位 立即 结束 的 细胞 形成 a 小 凹痕 在 的 细胞 膜

现在， 离开 的 移液器 在 位置 用于 a 少数 秒 到 轻柔地 清洁 的 细胞 表面 因此 那 a 强 密封 之间 的 移液器 和 的 膜 能 是 形成。 然后 释放 的 阳性 压力 在 的 移液器 到 启动 的 密封。 A 小 量 的 阴性 压力， 偶联的 与 阴性 移液器 电位, 结果 在 吉欧姆 密封件 形成 在……之内 a 少数 秒

随后， 改变 的 持握 潜力 在 的 放大器 到 减 60 毫伏 破裂 的 细胞 膜 与 a 系列 的 短 脉冲 的 吸力 然后 立即 记录 膜 电位 和 最小化 电容 伪影。 补偿 的 细胞 电容 和 获取 电阻 由 70% 到 85%.

获取 电阻 应该 是 监测 每个 30 秒 至 a 分钟, 和 如果 有 a 改变 的 20% 或 更多， 中止 的 实验 一旦 的 实验 具有 结束 和 足够 数据 有 已经 获得的， 处死 的 胚胎 由 去除 的 后脑 与 a 对 的 镊子