腹腔注射:一种将溶液输送到成年斑马鱼腹腔的方法

- 注射前将成年鱼禁食 24 小时，以排空胃肠道并在腹部创造额外的空间。手术当天，用三卡因麻醉鱼，然后将其放入湿海绵的槽中，腹侧朝上。

接下来，将所需量的注射液移液到一张实验室胶片上，并将其拉入胰岛素针头中。将针头与前后身体轴线成 45 度角放置在腹腔鳍之间，然后在中线处轻轻推入。将针头推进约 1 至 2 毫米进入腹腔，即腹壁和内脏器官之间的空间，然后缓慢注入感兴趣的溶液。等待 5 秒钟后再拔出针头，以免溢出。现在，小心地取下针头。

注射后，将鱼快速转移到装有淡水的回收罐中。如果鱼没有立即开始游泳，请在鳃附近旋转水以帮助它从麻醉中恢复。在示例方案中，我们将 marinum 分枝杆菌溶液注射到 RAG1 突变鱼中以研究感染。

- 首先，将 5 微升稀释的细菌溶液液滴挤出到一块石蜡膜上。然后，将液滴拉入 30 号胰岛素针头中。在这个实验中使用一条 5 到 8 个月大的鱼，一条是野生型鱼，另一条是 RAG 突变鱼。

将这些鱼的腹面朝上放在一块潮湿的泡沫塑料的缝隙中。将胰岛素针头以 45 度角注射到腹腔鳍之间。保持针头向上张开，以确保整个开口都在腹腔内。然后，慢慢注入细菌溶液。在此之后，小心地取下针头并立即将鱼转移到装满淡水的回收箱中。

在 7H10 板上每 15 分钟从使用的细菌等分试样中取样。将这些样品在 29 摄氏度下孵育 5 天，以验证感染剂量。定期检查鱼的健康状况，确保将任何有感染症状的鱼放入含有超过 0.02% 的 3-氨基苯甲酸乙酯的水中孵育，对它们实施安乐死。