斑马鱼心肌病模型：药物诱导的心脏毒性

- 心肌病 是 a 条件 在 哪个 的 心脏 肌肉 减弱 和 失去 的 能力 到 泵 血液 这 条件 能 是 重复的 在 斑马鱼 首先， 稀释 a 储备液 溶液 的 a 药物 负责任的 用于 心脏毒性 在 亨克氏液 平衡的 盐 溶液 到 准备 若干 工作 浓度 接下来， 位置 a 三卡因 麻醉的 鱼类 腹侧 侧面 向上 在 a 持握 海绵 在……下方 a 解剖 显微镜 位置 的 针 之间 的 骨盆 鳍 在 a 45 度 角度 从 水平的

现在 轻柔地 推 的 针 1 至 2 毫米 进入 的 腹膜的 腔 和 缓慢地 注射 的 药物 溶液 等待 五 秒 之前 拉 出 的 针 到 防止 的 溶液 从 渗漏 出。 立即 转移 的 鱼 到 a 清洁 储液罐 含有 新鲜 系统 水 记录 的 数量 的 鱼 死亡 每个 天 由于 到 严重 心脏毒性 损伤 到 的 心脏 肌肉 的 药物 结合 到 死亡 受体 当前 开启 的 心肌细胞 细胞 膜 和 触发因素 细胞凋亡 导致 在 严重 心脏毒性

创建 a 存活率 曲线， a 图 显示 的 概率 的 存活率 结束 时间 用于 每个 药物 浓度 在 的 例如， 我们 将 注射 阿霉素 或 DOX, 至 诱导 心肌病 在 一个 成年 斑马鱼 在 二 方法。

之前 到 注射 的 鱼 与 DOX, 快速 的 鱼 用于 24 小时 接下来， 组 的 鱼 尽管 麻醉的， 使用 a 清洁 过滤器 纸张 到 干燥 每个 鱼 和 测量 它的 身体 重量 制作 组 的 鱼 那 是 全部 在……之内 10% 的 的 相同 体重 因此 每个 组 能 是 注射 与 的 相同 剂量 的 DOX. 接下来， 计算 的 工作 浓度 的 DOX 用于 每个 组 因此 那 每个 组 是 注射 与 五 微升 的 溶液 和 接收 的 相同 剂量 的 DOX 由 体重

然后， 稀释 的 储备液 的 DOX 在 1x HBSS 混合 的 稀释 与 a 涡旋 和 然后 脉冲 旋转 的 稀释 到 保持 它 混合 一起 在 的 管 对于 的 注射， 准备 一个 注射 平台 在 a 清洁 100 毫米 佩特里 培养皿， 位置 a 海绵 随着 的 辅助 的 a 解剖 显微镜, 切割 a 腔 进入 的 海绵 到 保持 一 鱼类 四 厘米 通常 作品。

接下来， 到……上 a 34号针头 针， 连接 a 10微升 微量注射器 然后， 冲洗 的 针 与 1x HBSS 到 移除 任何 气泡 或 区块 从 的 注射器 和 管路 现在， 简要地 麻醉 的 成年 鱼 与 tricaine 然后， 浸泡 的 海绵 在 的 胚胎 水 与 三卡因 和 转移 a 鱼 到……上 的 海绵 与 它的 腹部 向上 用于 的 注射 现在， 腹腔内 注射 DOX 溶液 由 快速地 插入 的 针 在 a 45 度 角度 进入 的 中线 之间 的 骨盆 鳍 关于 1 到 2 毫米 深

然后， 缓慢地 释放 全部 的 的 DOX 溶液 之前 收回 的 针， 等待 五 秒 或者， 的 鱼 能 是 定位 侧向地 与 的 内部 到 的 正确。 然后， 注射 的 侧向 线 上方 的 骨盆 fin 与 的 斜面 向上 指向 朝向 7 点 在 a 45 度 角度 和 3 到 4 毫米 深 如果 或者 方法 用于 注射 是 成功 那里 将 是 a 红色 色调 在 的 腹部

之后 的 注射， 快速地 转移 的 鱼 到 a 清洁 杂交 储液罐 已填满 与 新鲜 系统 水 其中 它 能 恢复。 然后， 冲洗 的 针 与 HBSS 和 继续 到 注射 的 下一步 鱼 之后， 返回 的 注射 鱼 到 a 系统 与 跑胶 循环 但 分离 从 的 主要 系统 至 避免 交叉 污染。 对于 的 下一步 24 小时， 继续 到 快速 的 鱼 结束 的 首先 周 术后 注射， 是 某些 到 检查 的 鱼 每日 和 移除 任何 死亡的 鱼