原位注射：将组织特异性癌细胞植入成年小鼠

首先，将一只已麻醉的小鼠置于手术台上，并皮下注射镇痛药布托啡诺（buprenorphine），通常注射于肩部以缓解疼痛。接着，将小鼠的鼻子插入鼻罩，持续供给氧气和麻醉气体（如异氟烷）。然后使用实验室胶带固定小鼠四肢，并用两种消毒剂氯己定和碘液以及乙醇对胸部皮肤进行消毒。

现在使用剪刀在前胸壁中部做一切口，用镊子翻转皮肤以暴露白色的乳腺脂肪垫。将表达生物发光蛋白的癌细胞悬液小心注射到乳腺脂肪垫中。拔出针头前等待5秒，以防止液体回流。轻轻释放脂肪垫，并使用无菌缝线缝合切口并关闭。

注射到乳腺脂肪垫内的癌细胞会迅速分裂，形成肿瘤。手术后将动物放回笼中。密切观察动物，直至其从麻醉中恢复并开始自由活动。

在以下实验方案中，我们将把表达荧光素酶的乳腺腺癌细胞植入成年小鼠的乳腺脂肪垫中。

首先确认麻醉后的雌性小鼠对脚趾夹捏无反应，并将动物的四肢固定于手术板上。使用无菌棉签，依次以氯己定、碘伏和75%乙醇对手术区域进行消毒，然后在前胸壁正中做一处5毫米的皮肤切口。接着，提起切口旁右侧的皮肤，使用无菌显微解剖剪将皮肤与胸壁分离。

翻转皮肤以暴露右侧第二乳腺脂肪垫，使用配备28.5号针头的1毫升胰岛素注射器，小心地将20 µL癌细胞悬液通过创口注入脂肪垫内。将针头留在脂肪垫内5秒钟，使胶状的癌细胞蛋白混合物凝固，然后拔出针头，并用无菌5-0不可吸收缝线关闭切口。随后，将动物置于清洁的笼具中，持续监测直至完全恢复卧位。