导管内注射：将注射混合物递送至小鼠乳腺导管

导管内注射是一种将含有癌细胞、表达载体或治疗剂并添加示踪染料的注射混合物注入乳腺导管的技术。

进行此操作时，用注射混合物装填注射器。接着，将麻醉后的小鼠仰卧位放置于手术台上。在腹股沟或第五对乳腺之间的皮肤处做一切口。小心地将皮瓣与壁层腹膜分离，以暴露导管树。

使用镊子提起乳头，并小心剪开其外部以观察导管开口。用镊子提起皮瓣边缘，轻轻将注射器针头插入乳头以注入混合物。观察示踪染料在乳腺导管树中的移动情况。染料在导管树中扩散而未渗漏至间质组织，表明注射成功。

等待数秒钟以避免液体溢出，然后缓慢将针头从注射部位拔出。使用伤口夹闭合切口。在接下来的实验步骤中，我们将进行导管内注射，将表达Cre的腺病毒递送至小鼠乳腺组织。

在整个手术过程中使用无菌技术。在两侧第四腹股沟乳腺之间长约一厘米处的皮肤上做切口。仔细将皮瓣与壁层腹膜分离，以暴露乳腺导管树。

使用显微解剖剪刀，用钟表匠镊子小心夹住乳头，去除外部乳头组织，注意不要剪到周围皮肤。将约三至五微升的 Cre 腺病毒注射混合物吸入一支 25 微升的 Hamilton 注射器中，该注射器需安装 33 号金属接头针头。

根据混合物中包含的蓝色染料，估算注射器中注射混合物的体积。用精细的弯头镊子轻轻夹住皮瓣边缘，同时缓慢将Cre腺病毒注射混合物注入乳头，观察蓝色染料在乳腺导管树中的扩散情况。保持尽可能缓慢的注射速度，以避免损伤导管腔。

成功的导管内注射表现为注入的液体在整个导管树中均匀扩散，且未泄漏至间质区。轻轻将针头从乳头处抽出，以避免注入的液体泄漏。检查乳腺远端或注射侧乳头周围区域。

染料扩散至周围基质（如此处所示）表明注射进入了乳腺脂肪垫，而非成功的导管内注射。使用伤口夹闭合手术切口及皮肤。

将小鼠从麻醉状态中取出，置于清洁笼盒内的加热垫上进行恢复。按照文本方案中所述监测乳腺肿瘤的发育情况。