zPDX-侵袭性分析：利用斑马鱼胚胎异种移植模型研究转移性癌细胞的侵袭行为

斑马鱼胚胎异种移植模型可用于研究癌细胞的侵袭。通过将荧光标记的转移性癌细胞和非癌细胞注射到两个转基因胚胎的卵黄周隙中来构建异种移植模型。卵黄周隙位于胚胎表皮与卵黄囊之间。让胚胎生长所需的时间。

在此期间，转移性癌细胞在注射部位剧烈增殖，而非癌细胞则保持稳定。孵育结束后，使用巴斯德吸管将胚胎转移至玻璃底悬浮培养皿中。去除多余的卵水，并将胚胎调整至成像所需的合适位置。在培养皿上方加盖盖玻片，随后将培养皿置于明场显微镜下观察。

捕获图像并分析这两类细胞的侵袭行为。转移性癌细胞倾向于从注射部位侵入血管，随循环系统移动，随后侵入周围组织并增殖。相比之下，非癌细胞则停留在注射部位。在本示例实验方案中，我们将乳腺癌细胞注射至斑马鱼异种移植模型的卵黄囊间隙和居维叶管，以研究其转移过程。

为了观察转移情况，使用巴斯德吸管将已注射的斑马鱼胚胎转移至玻璃底聚苯乙烯培养皿中，并去除多余的卵水。使用共聚焦显微镜在低倍镜下对胚胎整体进行成像，以获得肿瘤细胞扩散的总体模式。

使用488纳米激光观察斑马鱼胚胎的血管系统，使用543纳米激光观察植入的、用红色荧光标记物标记的肿瘤细胞。接下来，以八到十个步进扫描胚胎，以获得高质量图像。