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间质液压力 (IFP) 是液体在组织中细胞之间的间隙中施加的力。首先,用 2% 异氟烷与氧气混合麻醉荷瘤小鼠,并将其固定在计算机断层扫描或 CT-IFP 机器人平台上。现在,用造影剂包裹的脂质体注射到小鼠的外侧尾静脉中,以观察肿瘤。将动物放回笼子里,让它恢复。
注射后 48 至 72 小时之间,将麻醉的鼠标固定在 CT-IFP 平台上,并在肿瘤上选择几个均匀分布的位置来测量 IFP。接下来,在插入前用肝素盐水溶液冲洗 IFP 系统针头。将针头放在所选位置并将其插入肿瘤组织内。
现在获取所有位置的图像并使用软件测量 IFP。由于其致密性、异常血管和淋巴系统缺陷,肿瘤中的 IFP 通常很高。这可能导致脂质体在肿瘤外围积累。在以下协议中,我们将演示测量实体瘤中 IFP 的技术。
要测量 IFP,请将动物贴在 CT-IFP 机器人平台上,以便肿瘤被固定并可供 CT-IFP 机器人系统访问。如刚才所示,获得解剖显微 CT 扫描,然后将针前插入数据加载到 CT-IFP 机器人对准软件中,并调整窗口和水平以可视化肿瘤。单击任何图像中肿瘤的边缘,然后在肿瘤的相邻侧选择第二个边缘位置。
软件将沿两点之间的线性线计算一系列位置。然后从列表中选择一系列 5 到 8 个均匀分布位置的 x、y 和 z 坐标。接下来,用生理盐水肝素溶液冲洗 IFP 系统针头,并将第一个预定针头位置输入到 CT-IFP 机器人控制软件的 XYZ 坐标窗口中。
按 Go 按钮将机器人移动到所需位置。然后依次对于每个针头位置,单击 Insert Needle(插入针头)按钮,将针头插入组织。捏住并松开 PE-20 管,以确认 IFP 针头和组织之间有良好的流体交通,并观察 IFP 测量值是否增加并返回到 IFP 采集软件上的预捏值。最后,在插入针头的情况下进行解剖 CT 扫描,单击扫描结束时的缩回针头按钮,将针头从组织中取出。