体内光动力疗法抗肿瘤疗效分析：一种评估光敏剂在荷瘤小鼠中光毒性潜能的技术

－ 光动力疗法（PDT）是一种基于光的治疗方法，涉及光敏剂分子。这些分子可被特定波长的光激活，并将细胞中存在的分子氧转化为活性氧物种，从而诱导细胞死亡。首先，通过将适当浓度的肺癌细胞悬液注射到麻醉小鼠的下侧腹部，建立荷肺肿瘤小鼠模型。持续监测，直至肿瘤生长至适当体积。

随后，制备将所需光敏剂负载于靶向肺癌的纳米颗粒递送系统中的悬浮液。将该悬浮液注射到麻醉的荷瘤小鼠尾静脉中。给予足够时间，使含有光敏剂的纳米颗粒到达肿瘤部位并进入癌细胞。

接下来，对小鼠进行麻醉。将PDT激光器置于肿瘤上方的合适距离，以确保其整个体积得到均匀照射。在适当的波长下对肿瘤照射预定的时间。将小鼠置于避光的笼子中持续24小时。每日监测肿瘤体积的变化。注射了光敏剂并接受照射的荷瘤小鼠显示出肿瘤体积减小。在本实验方案中，我们将分析包裹在透明质酸酰胺纳米颗粒中的光敏剂——虫草素B，在A549荷瘤小鼠模型中抗肿瘤效果的评估。

收集 A549 细胞，并将一百万个细胞重悬于 0.1 毫升 RPMI 1640 培养基中。将重悬的细胞置于冰上。接下来，准备一只 BALB/C 雄性裸鼠用于注射。然后将细胞吸入一支配有 26 号针头的 1 毫升注射器中，并注射到小鼠的左侧 flank 部位。每天使用游标卡尺测量肿瘤大小。

当肿瘤体积达到约200立方毫米时，开始实验，首先称量每只小鼠的体重。然后将纳米颗粒溶解于PBS中，制成终浓度为2毫克/毫升的溶液，并根据每克小鼠体重加载1微升该悬浮液至配备26号针头的1毫升注射器中。在第0天和第7天通过尾静脉注射给予纳米颗粒。

每次注射后24小时，麻醉小鼠并将肿瘤部位置于光动力治疗光纤下方，使其距离光纤一厘米。

为了获得最佳效果，必须用光覆盖整个肿瘤表面。

佩戴激光安全眼镜，关闭房间电源开关，在第1天和第8天分别使用光动力治疗激光照射肿瘤部位500秒。激光治疗后，将小鼠置于笼中避光饲养24小时。每天观察肿瘤体积及肿瘤部位的变化情况，使用游标卡尺测量肿瘤大小，并拍摄肿瘤部位照片以检查表面改变。