基于G-10柱的白血病细胞分选：一种从骨髓基质细胞中纯化急性淋巴细胞白血病细胞的方法

首先，将胰蛋白酶加入含有与骨髓基质细胞共培养的白血病细胞的培养板中，以进行细胞解离。离心后，使用预热的培养基重悬细胞沉淀，以维持细胞活性。G-10 柱中含有交联葡聚糖珠，遇水膨胀形成凝胶基质。

平衡 G-10 柱，使用预热的培养基填充凝胶珠之间的空隙，确保培养基缓慢从柱中流出。保持柱内适宜的温度，以防止气泡形成。将细胞混合物缓慢加样至 G-10 柱的凝胶珠上。在室温下将细胞孵育于 G-10 柱上，持续所需的时间。根据细胞表面特性及大小，凝胶珠优先阻滞较大的骨髓基质细胞，从而实现白血病细胞的分离。

向柱中加入预热的培养基，收集白血病细胞悬液。离心细胞悬液，并将沉淀重悬于适当的缓冲液中。使用纯化的白血病细胞群体进行后续分析。在以下示例中，我们将利用G-10柱从基质共培养物中分离出纯化的白血病细胞群体。

— 对于每个亚群，将旋塞完全关闭，使用1000微升移液器将全部1毫升细胞悬液逐滴加至已准备好的G-10柱顶部，确保细胞保持在G-10沉淀的表面或内部。室温下让细胞在G-10沉淀上孵育20分钟。随后，向柱中加入1至3毫升新鲜的预温培养基，并打开旋塞，使培养基以逐滴方式缓慢流出柱体。

继续以1至2毫升的增量向各列中加入预热的培养基。当收集到总共15至20毫升的白血病细胞后，关闭旋塞并盖上收集管盖。随后离心细胞，将沉淀重悬于适当的下游分析缓冲液中。