May-Grunwald Giemsa 染色法:一种骨髓细胞染色方法

0 次观看3:12 分钟 • April 30th, 2023

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- May-Grunwald Giemsa(MGG)染色是一种用于骨髓细胞(BMCs)差异染色的两步法。开始染色时,取载玻片上浓缩的单层BMC涂片。让涂片自然风干。首先用含有伊红和亚甲蓝溶解于甲醇中的May-Grunwald染液处理细胞。

溶剂甲醇最初用于固定细胞。亚甲蓝是一种带净正电荷的碱性染料,可对核酸等酸性细胞组分进行染色。伊红是一种带净负电荷的酸性染料,可对细胞质中的阳离子蛋白等碱性细胞组分进行染色。用pH 6.8的缓冲溶液处理细胞,以促进染料沉淀并有效地与细胞物质结合。

此外,使用吉姆萨染液(含有酸性和碱性染料)对细胞进行处理,以增强整体染色效果。其中,碱性染料亚甲蓝和天青可增强酸性组分的染色,而酸性染料伊红则可增强碱性组分的染色。

在显微镜下,红细胞呈粉褐色,血小板呈细小的紫色点状。粒细胞具有紫蓝色的多叶核和红色颗粒状的细胞质。无粒细胞呈淡蓝色,细胞核较大,呈紫色至粉红色。在以下实验方案中,我们将展示骨髓细胞的MGG染色方法。

— 准备骨髓细胞以进行染色时,首先将载玻片放入带有预装滤纸卡的一次性染色缸中,并将染色缸放入细胞离心机。向每张滤纸卡的腔室中加入 100 微升 FACS 缓冲液,短暂离心载玻片。离心结束后,向每个腔室中加入 100 微升细胞,然后离心细胞。

然后,小心地将载玻片从染色缸中取出,进行空气干燥。为了染色骨髓细胞,将载玻片浸入含有May-Grunwald染液的Coplin缸中,染色5分钟。接着,将载玻片转移至pH为6.8的缓冲液中,浸泡1分钟。随后将载玻片放入Giemsa R染液中染色10分钟,再用pH中性水冲洗10秒。

洗涤后,让载玻片自然晾干,并在每个样本上滴加一滴封片剂。然后将盖玻片的一边先接触载玻片,再小心地将盖玻片缓缓放下覆盖在细胞上,轻轻按压以去除气泡。

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最后更新:15 八月 2026