胰岛移植：一种将胰岛植入小鼠眼前房用于活体成像的方法

胰岛中含有可分泌胰岛素的β细胞。在1型糖尿病患者中，产生胰岛素的β细胞功能失常。对这些患者进行胰岛移植有望实现血糖控制。为了评估移植效率，我们使用动物模型，例如将小鼠的前房作为移植物植入和活体成像的理想部位。

移植胰岛时，将麻醉的小鼠置于温暖的加热垫上，并在小鼠背部皮下注射镇痛剂布托啡诺以缓解疼痛。接着，将小鼠的鼻子插入鼻罩，持续供给氧气和异氟烷麻醉剂。

将小鼠头部固定在头夹中以暴露眼睛，使用钝头镊子轻轻拉开眼睑，使眼球突出。用荧光标记的胰岛细胞装填套管。将套管尖端的一半插入角膜。抬起角膜，轻柔地注入胰岛细胞，取出套管，并涂抹眼用凝胶。

在所需时间后，将小鼠置于双光子显微镜下并采集图像。您可观察到血管在移植物内形成微血管网络。在以下实验方案中，我们将人胰岛移植物植入小鼠眼前房。

首先，将小鼠置于温暖的加热垫上，将其头部固定在头夹中，并戴好鼻罩。用拇指和食指轻轻抬起小鼠头部。使用两侧的金属部件将其固定，确保耳棒正好固定在耳朵正下方。在小鼠背部皮下注射布托啡诺溶液。用钝头镊子轻轻拉开准备移植的眼睑。将眼球轻柔挤出，并用套有聚乙烯管的镊子松松固定。

将胰岛转移至含有PBS的培养皿后，用眼用套管吸取约20至30个胰岛。使用25号针头，斜面向上，小心地将针尖插入角膜，做单侧切口。用预先装有胰岛的套管轻轻抬起角膜，并缓慢将胰岛释放入眼内。缓慢撤出套管，并在眼部涂抹眼用凝胶。

10分钟后，取下夹住眼睑的镊子，将眼睛恢复至正常位置。若需使用双光子显微镜对移植的人胰岛进行成像，请将头部固定平台置于显微镜下，并在眼睛上涂抹眼用凝胶，作为角膜与物镜之间的浸没液。将眼睛置于物镜下，按照文本稿件中的描述对移植的人胰岛进行成像。