原位同系移植瘤模型构建:一种建立胰腺肿瘤小鼠模型的技术

0 次观看 • 3:59 分钟 • April 30th, 2023

— 在原位同系移植肿瘤移植过程中,将来自同种癌症供体的肿瘤细胞或肿瘤组织碎片移植到与肿瘤组织类型相匹配的受体器官或部位。首先取一只携带来源于胰腺细胞肿瘤的麻醉供体小鼠,对局部区域进行消毒,并通过手术切除肿瘤。用洗涤液清洗组织以去除血液,并将其切成小块。接着,将一只麻醉的受体小鼠置于右侧卧位,对其腹部区域进行消毒。通过手术暴露脾脏。

接下来,轻轻从脾脏下方拉出部分胰腺。将肿瘤组织碎片置于胰腺上,并将其缝合固定。缝合腹腔,让小鼠在笼中恢复。每天监测受体小鼠,观察原位胰腺肿瘤的生长情况。在接下来的实验方案中,我们将展示将来源于C57 black 6供体小鼠的胰腺导管腺癌同系移植物,移植至C57 black 6受体小鼠胰腺中的操作过程。

- 使用天平监测 C57 black 6 小鼠的体重。同时,使用游标卡尺测量荷瘤供体小鼠的肿瘤体积。按照实验方案,在生物安全柜中对动物实施安乐死后,使用碘伏棉签对肿瘤周围皮肤进行消毒。根据文本方案中的详细步骤手术切除肿瘤后,将肿瘤置于含有 20 毫升预冷至 4°C 的磷酸盐缓冲液(PBS)的培养皿中。若存在污染血液,将肿瘤转移至另一培养皿,并用 PBS 清洗肿瘤。

将肿瘤切成两半,去除多余的皮肤、血管、钙化组织和/或坏死组织,仅选取完整的肿瘤组织块,并放入无菌的50毫升离心管中。在将离心管转运至独立的动物房进行药理学研究前,加入20毫升磷酸盐缓冲液(PBS)。为进行原位移植准备,将完全麻醉的小鼠固定于实验板上,呈右侧卧位。用碘液对脾脏周围的皮肤进行消毒,随后用75%乙醇脱碘。

找到脾脏的中点,在腹部做一厘米长的垂直切口以暴露脾脏。使用平头镊子轻轻拉出脾脏下方的一部分胰腺组织,用9-0可吸收手术缝线将来自供体小鼠的同系移植瘤组织缝合到受体小鼠的胰腺上。用6-0丝线以双层缝合法关闭腹腔。通过压迫实现止血。

完成肿瘤移植后,将动物置于温暖的笼子中,直至无出血或肿瘤组织渗漏发生。持续监测动物,直至其恢复足够的意识以维持胸卧位。待动物从麻醉中完全恢复后,将其送回动物房。通过触诊脾脏附近的腹部来监测荷瘤小鼠,并筛选出成功建立原位肿瘤的小鼠。

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