不可逆电穿孔：一种用于小鼠胰腺肿瘤消融的技术

— 不可逆电穿孔（IRE）是一种通过向胰腺肿瘤施加短暂的高电压电流脉冲，导致肿瘤细胞发生永久性损伤，从而消融胰腺肿瘤的技术。IRE 对靶向肿瘤区域具有高度选择性和可及性。该方法不会对邻近的健康细胞造成热损伤，因此是一种具有前景的抗肿瘤治疗手段。

首先将麻醉后的小鼠侧放，解剖其腹腔，以定位胰腺表面的肿瘤。接着将电极置于肿瘤部位两侧，施加预定时间的靶向电脉冲。当电流超过一定阈值时，可使肿瘤细胞膜上形成永久性孔隙，阻止细胞恢复至稳态。

这些孔道会导致细胞内的内容物外泄，从而引发细胞逐渐发生凋亡。接下来，关闭腹腔，并将小鼠放回饲养笼中使其恢复。最后，在电穿孔后监测胰腺肿瘤体积的缩小情况。在接下来的实验方案中，我们将演示一种通过不可逆电穿孔破坏小鼠胰腺肿瘤的方法。

— 在肿瘤直径达到6毫米之前，将麻醉后的动物置于右侧，以便接触肿瘤，并使用剪刀和酒精棉片清洁肿瘤部位。用镊子提起肿瘤正下方的皮肤，将两根针阵电极平行于身体插入皮肤，使电极位于肿瘤两侧，注意避免电极刺入腹腔。

将电穿孔仪设置为输出100微秒脉冲，频率1赫兹，电压1,500伏/厘米，共150次脉冲；使用脚踏开关触发脉冲，每10次脉冲为一组，组间间隔10秒，以确保脉冲组之间有足够时间散热。

— 在递送 IRE 脉冲期间会发生肌肉抽搐，且在初始脉冲组期间更为明显，因此每次脉冲组结束后，应确保电极仍处于预期位置，并确认动物仍处于镇静状态。

— 给药不超过200秒后，移除电极，并记录电穿孔仪上显示的实际输送电压。然后将小鼠放回笼中。对于原位移植瘤的不可逆电穿孔（IRE），在肿瘤接种后8至10天，使用钝头镊子将肿瘤拉出体外，并用镊式电极的铂金电极紧密夹住肿瘤。

按照刚刚演示的方法施加电穿孔脉冲，在最后一组脉冲期间保持肿瘤外置至少60秒，以监测是否有出血迹象。然后将肿瘤复位至腹腔内，并按演示方法缝合切口，持续监测动物直至其完全恢复。