建立结直肠癌PDOX小鼠模型：在小鼠模型中研究结直肠癌的进展 结直肠癌, PDOX模型, 小鼠模型, 肿瘤异种移植, 癌症进展, 原位移植, 患者来源的异种移植, 肿瘤微环境, 转移, 预临床模型

— 淋巴结（LNs）由于其中存在的基质细胞，为肿瘤生长提供了微环境。滤泡树突状细胞（FDCs）是淋巴结中最丰富的基质细胞类型，可释放趋化因子、细胞因子和生长因子，这些因子与结直肠癌干细胞相互作用，促进肿瘤生长。

FDCs 还可促进结直肠癌向肺和肝等结外器官转移。为了研究结直肠癌的进展过程，我们将来源于患者的肿瘤细胞植入与肿瘤组织类型相匹配的器官中，采用免疫缺陷小鼠模型，即患者来源的原位异种移植模型（PDOX）。

首先，使用实验室胶带将麻醉后的小鼠仰卧固定在解剖板上。然后，在试管中混合所需数量的荧光素酶标记的结直肠癌细胞和 FDCs。将所得悬液吸入注射器中。接着，找到小鼠的肛门开口，并将制备好的结直肠癌细胞混合物注射至直肠的黏膜下层。

为了观察转移负荷，每周通过腹腔注射荧光素酶底物（luciferin），并使用生物发光成像技术对小鼠进行成像。在荧光素酶和ATP存在的条件下，癌细胞中的荧光素酶底物转化为氧荧光素，发出蓝绿色光。在以下实验方案中，我们将建立一种用于研究结直肠癌进展的原位异种移植小鼠模型。

— 建立结直肠癌小鼠模型时，将一只6至8周龄的雄性NOD SCID小鼠麻醉后置于解剖显微镜下，仰卧位固定，将鼻部连接异氟烷鼻罩，并用胶带固定前肢以保持稳定。在尾根部下方放置一个小物体（如一小块纱布），抬高肛门以改善视野和操作角度。使用弯曲、润滑且钝头的镊子扩张肛管，暴露远端肛门和直肠黏膜，并清除粪便。

将无菌的30号可拆卸针头连接到50微升玻璃注射器上。用该注射器吸取先前步骤中制备的10微升肿瘤细胞与HK细胞悬液。将10微升细胞悬液注射至肛管上方1至2毫米处的远端直肠后黏膜下层，注意避免穿入盆腔。最后，将小鼠从异氟烷鼻罩中取出，并在术后观察一小时，注意有无痛苦迹象。