牵引力显微镜检测：一种量化癌细胞在细胞外基质上施加牵引力的方法

— 细胞会产生作用于细胞外基质的机械力，这种力被称为牵引力。细胞施加牵引力以完成多种任务，例如迁移和增殖。

转移性癌细胞施加的牵引力大于正常细胞；因此，我们通过牵引力显微镜检测法来测量细胞在弹性基质上施加的牵引力。首先将所需数量的结肠癌细胞接种到聚丙烯酰胺水凝胶上，这种凝胶可在体外模拟细胞外基质（ECM）。该凝胶含有纤连蛋白，有助于细胞黏附于表面，同时还含有荧光微珠，用于标记位置变化。

将细胞孵育所需的时间。细胞会附着在凝胶上并施加牵引力，导致荧光微珠发生位移。随后将培养板置于荧光显微镜下，拍摄位移后的荧光微珠图像。接着向培养板中加入适量的胰蛋白酶，使细胞脱离，然后使用适当的软件分析细胞施加的牵引力。在以下实验方案中，我们将进行牵引力显微镜检测，以分析人结肠癌细胞的细胞牵引力。

— 进行牵引力显微镜检测时，首先将0.25%胰蛋白酶-EDTA 10% SDS溶液在37摄氏度水浴中预热10分钟，然后开始牵引实验。从细胞培养孵箱中每次取出一块凝胶，置于显微镜载物台上。在视野中找到单个细胞后，移去培养皿盖，拍摄该细胞的相差图像。

接下来，将成像模式切换至荧光模式，并选择合适的滤光片。在此过程中，不要移动显微镜载物台或样品。然后，拍摄细胞牵引力作用下发生位移的荧光微球的图像。随后，向培养皿中加入1毫升胰蛋白酶-SDS溶液，以使细胞从凝胶上脱离。在细胞被去除后，拍摄微球的参考图像。