患者来源的异种移植模型构建：一种生成黑色素瘤小鼠模型的技术

— 在患者来源的异种移植（PDX）模型中，来自人类患者的肿瘤细胞或组织碎片被植入免疫缺陷的受体小鼠体内。PDX模型可模拟人类肿瘤微环境的生物学和分子特征。要建立黑色素瘤PDX模型，首先从黑色素瘤患者身上获取肿瘤组织。去除肿瘤中的坏死组织，将肿瘤切碎以制成匀浆。接着，将受体小鼠麻醉并置于俯卧位进行准备。在背部皮肤上做一个小的外科切口，轻轻切开筋膜膜或皮下疏松结缔组织层，使皮肤与下方肌肉层分离，从而为肿瘤植入创造一个囊腔。

轻柔地将肿瘤悬液转移至皮下 pocket 中。随后，向 pocket 内注射人工细胞外基质，以稳定并固定植入的肿瘤细胞。使用外科缝合钉闭合伤口，并让小鼠恢复。每周监测受体小鼠，观察异种移植肿瘤的生长情况。在接下来的实验方案中，我们将演示将患者来源的黑色素瘤肿瘤细胞皮下植入免疫缺陷型 NSG 小鼠，以建立黑色素瘤患者来源的异种移植模型。

— 移植手术切除或手术活检组织时，首先剃除6至8周龄麻醉NSG小鼠背部下方的毛发，保留约1.5厘米至3厘米的无毛区域。在培养皿中准备好肿瘤组织块，并将肿瘤悬液分成单个团块，用于手术移植。使用手术刀片在小鼠背部中央做一个长约5毫米的切口。用一把镊子夹起切口远离操作者一侧的皮肤，另一只手持剪刀，通过小幅度剪切筋膜膜，轻柔地将皮肤与肌肉层分离，从而形成一个可容纳肿瘤组织的皮下腔隙。

使用手术刀片拾取一块肿瘤组织以及一份单独的肿瘤匀浆组织团块，轻轻将其放入所形成的组织袋中。然后，在组织袋内的肿瘤组织团块上加入 100 µL 人工细胞外基质。用两对镊子从切口两端向上提起，使伤口边缘紧密贴合。随后，使用一到两个伤口夹闭合伤口。皮下注射 1–5 mg/kg 的镇痛剂。当伤口完全愈合后（约 7 天），移除伤口夹。