化学诱导的两阶段皮肤癌变模型：一种体内小鼠皮肤癌实验模型

— 在实验性癌症小鼠模型中，动物体内诱导产生的癌症在表型上类似于人类癌症。这类模型为评估潜在疗法的有效性提供了高效的平台。为建立两步法皮肤癌发生模型，首先将免疫缺陷型小鼠麻醉后置于俯卧位并做好准备。剃除其体表毛发以暴露皮下皮肤。在第一步中，将一种强效的肿瘤启动剂涂抹于暴露的背部皮肤上。

处于静止期（休止期）的毛囊含有不活跃的皮脂腺。由于缺乏皮脂流动，导致化合物在这些毛囊中积聚。该化合物扩散至周围细胞内，并诱导靶基因发生突变，主要发生在毛囊干细胞或初级角质形成细胞干细胞中。基因表达的改变导致这些细胞发生肿瘤启动。

在第二步中，在预定的时间间隔内，反复在背部皮肤上施用适当的促进肿瘤生长的试剂。该化学物质会刺激已启动细胞群体的扩增。持续的细胞增殖将导致形成称为乳头状瘤的癌性增生物。

在以下实验方案中，我们展示了使用化学物质DMBA（一种诱变剂）和TPA（一种促生长剂）建立两阶段小鼠皮肤癌模型的方法。

— 实验开始前，将具有攻击性的7至9周龄小鼠单独分笼饲养，以避免打斗及皮肤损伤。进行皮肤乳头状瘤诱导时，首先剃除实验动物背部的毛发，并对每只小鼠进行个体称重。剃毛后48小时，使用移液器将50微克DMBA溶于200微升丙酮中，涂抹于每只麻醉小鼠的剃毛区域。

对于皮肤乳头瘤的促发，在使用DMBA七天后，每周两次在皮肤上涂抹含有5微克TPA的200微升丙酮溶液，持续至实验结束。每周检查动物的乳头瘤情况，并对每个单独的乳头瘤进行拍照，将其大小记录在图谱上。

直径大于1毫米且持续存在超过一周的可触及肿块被视为乳头状瘤。