Name: 常压LAESI质谱生物组织和生物膜的分子成像 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-09-03T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: 了解常压LAESI质谱技术用于生物组织和生物膜的分子成像方法。该技术利用中红外激光进行样品消融，无需化学处理即可直接分析，实现高空间分辨率的分子分布可视化。

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作者感谢美国国家科学基金会（资助号：0719232）、美国能源部（DEFG02-01ER15129）以及Protea Biosciences公司（西弗吉尼亚州摩根敦）对本工作的资金支持。作者还感谢Jessica A. Stolee在本实验方案视频拍摄过程中提供的帮助。

以下方案描述了激光烧蚀电喷雾电离（LAESI）实验的主要步骤，并提供了针对动物和植物组织样本进行横向及三维（3D）成像的代表性示例。更多实验和技术细节可参见其他文献1-6。
1. 组织制备与封片
<ol>
 <li>若需要切片，使用冷冻切片机在 -10 至 -20 °C 下将组织切成 10–100 μm 厚的切片，除非特定组织类型另有建议。</li>
 <li>将切片直接贴附到平整表面（例如经化学预清洁的载玻片）上，无需使用化学修饰剂。对于已切片的组织，应进行解冻贴片，并在解冻贴片后立即将样品台固定于帕尔贴冷却台上，以确保分析过程中组织始终处于冷冻状态。此步骤旨在最大限度减少或防止切片中分子的迁移。</li>
 <li>如有需要，可使用配备低功率风扇的散热器，以促进帕尔贴冷却台的热量散发，维持组织的冷冻状态。</li>
 <li>在长时间（1–2 小时）的高湿度环境中，需检查组织表面是否出现水或冰的冷凝现象。组织表面的水分冷凝会对 LAESI 实验中的成像性能产生不利影响。1</li>
 <li>如有需要，可使用室内除湿机，或将冷却后的样品置于充满惰性气体（例如干燥氮气）的环境舱内，以防止冷凝。1</li>
</ol>
2. LAESI 离子源的优化
LAESI 离子源由一个中红外激光器、一系列用于导光和聚焦的光学元件，以及附加的样品支架、冷却组件、平移台和溶剂输送系统组成。图1展示了这些元件相对于质谱仪常压离子源入口的典型排列方式。
<ol>
 <li>如图1所示，将样品置于质谱仪采样锥孔下方15-20 mm处（dOR-FP).</li>
 <li>操作中红外激光器 2.94 μm 波长和 10 Hz 重复频率。将激光输出衰减至约 ~100 μJ/puls能量。</li>
 <li>使用金镜组合以及在激光波长下透明的聚焦透镜（例如平凸 CaF₂ 透镜）2 或使用ZnSe透镜）以垂直入射方式将激光脉冲能量耦合到样品中（参见图1中相对于样品表面的右入射角）。</li>
 <li>将中红外光束轴线置于质谱仪采样锥孔前方5-8 mm处。</li>
 <li>调节聚焦透镜的位置和激光束的脉冲能量，以在焦点处实现组织去除。被消融体积的尺寸决定了成像应用中像素（或三维成像中的体素）的大小。</li>
 <li>将纳米喷雾电离源与质谱仪进样口轴线对齐，并使电离源尖端与进样口之间的距离约为 10 mm（见图 1）。</li>
 <li>对于电喷雾，分别使用含0.1%乙酸或0.1%乙酸铵添加剂的50%甲醇溶液，以适用于正离子模式或负离子模式。根据样品情况，可使用乙腈、异丙醇等其他有机溶剂替代甲醇，浓度应根据分析任务适当调整。电喷雾的稳定性对成功成像至关重要。根据所选溶剂的不同，需调节流速和喷雾电压以获得稳定的喷雾。</li>
 <li>用于反应性LAESI6 在成像应用中，电喷雾溶液可能含有反应物。</li>
 <li>使用注射泵以约300 nL/min的流速将电喷雾溶液通过电喷雾发射器输送。</li>
 <li>如果质谱仪的入口保持在低电压（&lt;500 V 相对于接地点），通过直接向电喷雾发射器施加高电压（例如 3000 V）或经由金属接头产生电喷雾；否则，应将电喷雾发射器直接接地或通过金属接头接地以建立电喷雾。</li>
 <li>以 LAESI 实现最高效离子生成时，应使电喷雾源在锥-射流喷雾模式下运行。有关操作参数对喷雾模式及其对质谱图影响的讨论，请参见其他文献中的论述。5,7,8</li>
 <li>仔细调整LAESI装置的相对距离，以优化LAESI离子产率，同时确保激光束、发射器和孔口轴线位于同一平面。详细操作步骤请参见其他资料。5</li>
 <li>使用光学显微镜测定样品上消融坑的横向尺寸。</li>
 <li>在三维LAESI成像实验中，使用单个脉冲进行消融，并通过例如光学显微镜的z-stack模式确定体素的深度。3</li>
</ol>
3. 分子成像与数据分析
在成像实验中，组织样本在激光的焦平面内沿X和Y方向移动，步长等于或大于消融光斑的尺寸。空间分辨率受限于入射激光束的聚焦能力。
<ol>
 <li>在样品表面选择感兴趣的区域，并获取相应边界的 (X, Y) 坐标。</li>
 <li>选择一种光栅化算法（例如自适应网格、选定区域成像、矩形网格、螺旋模式、Z 扫描等），用于在待成像区域内，以每个像素设定的停留时间对样品表面进行逐点扫描。</li>
 <li>使用三轴平移台及能够按照预设网格对样品进行光栅扫描的软件。</li>
 <li>计算成像所需的总时间。</li>
 <li>禁用质谱仪的数据采集时间限制。如果无法禁用，则将数据采集时间限制设置为计算所得的成像时间值。</li>
 <li>启动中红外激光源，其重复频率应适当，以确保在每个像素的停留时间内产生足够的质谱信噪比，从而进行 LAESI 横向成像实验。对于三维分子成像，应使用高于激光源重复频率的谱图采集速率，以成功对单个激光脉冲产生的离子进行质谱分析。等待 START 信号以启动消融序列。</li>
 <li>开启电喷雾源。确保溶液量足以支持整个成像过程所需的时间。</li>
 <li>同时启动质谱采集、中红外激光消融和表面扫描。</li>
 <li>当成像运行结束后，停止表面扫描、中红外激光发射和数据采集。</li>
 <li>关闭激光源。</li>
 <li>关闭高压电源。</li>
 <li>关闭注射泵。</li>
 <li>将质谱仪设置为待机（STANDBY）模式。</li>
 <li>关闭帕尔贴冷却电子设备。</li>
 <li>若使用了惰性气体，则关闭其气流。</li>
 <li>使用软件将横向成像中的像素或三维分析中的体素的绝对坐标与相应的质谱数据相关联。</li>
 <li>绘制选定 m/z 值的离子强度信号随分析绝对坐标的分布图，以获得二维横向和三维分子图像。</li>
</ol>
4. 代表性结果
图2展示了一些主要组织类型和成像模式的代表性结果。图A显示了一个动物组织切片的案例，该切片在实验过程中被冷冻以防止脱水1。此外，样品被置于干燥的氮气环境中，以避免环境中的水蒸气在样品表面冷凝。使用LAESI对大鼠脑（Rattus norvegicus）的100 μm厚冠状切片进行侧向成像。脑部的解剖区域（见图A中的光学图像）与质荷比（m/z）为728.559的缩醛磷脂PC(O-33:3)和/或PE(O-36:3)的分子成像结果显示出良好的对应关系。
图B展示了斑马植物（Aphelandra squarrosa）叶片组织的三维LAESI成像结果。由于叶片具有天然的抗脱水防御机制，因此可在常温常压环境下直接对样品进行检测3。所获得的三维分子图像揭示了多种初级和次级代谢物的分布模式。其中，质荷比（m/z）为285.076的木犀草素在从顶部数第二层和第三层的黄色区域中离子计数较高，而在其他区域呈均匀分布。该分布模式与光学图像中观察到的斑驳纹路一致。
<img src="/files/ftp_upload/2097/2097fig1.jpg" alt="使用中红外激光进行2.94 μm瞬态吸收测量的光学激发装置示意图。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图1"> 图1. LAESI系统的示意图（ES，电喷雾发射器尖端；OR，质谱仪采样锥孔；FL，聚焦透镜；FP，焦点；P，帕尔帖冷却台；HS，散热片）。在中红外消融过程中喷出的部分颗粒物（红色点）与电喷雾合并，形成含有样品分子和离子（绿色点）的带电液滴。这些液滴释放的离子由质谱仪进行分析和记录。
<img src="/files/ftp_upload/2097/2097fig2.jpg" alt="质谱成像，m/z 728.559，组织切片分析；植物表面三维微结构图。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图 2"> 图 2. 激光烧蚀电喷雾电离质谱横向与三维成像的代表性结果。 （A）上图展示了大鼠（Rattus norvegicus）冠状脑切片的光学图像，以及针对缩醛磷脂 PC(O-33:3) 和/或 PE(O-36:3) 在 m/z 728.559 处获得的分子图像。白色比例尺代表 1 mm。经许可转载自（参考文献1）。版权所有 © 2010 美国化学会。 （B）下图展示了斑叶珊瑚花（Aphelandra squarrosa）叶片的三维成像结果。在自上而下的第二层和第三层的黄色区域中，检测到 m/z 285.076 的芹菜素离子信号更强，而在其他区域呈均匀分布。经许可转载自（参考文献3）。版权所有 © 2009 美国化学会。

<ol><li>Nemes, P., Woods, A. S., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Imaging+of+Small+Metabolites+and+Lipids+in+Rat+Brain+Tissues+at+Atmospheric-Pressure+by+Laser+Ablation+Electrospray+Ionization+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Imaging of Small Metabolites and Lipids in Rat Brain Tissues at Atmospheric-Pressure by Laser Ablation Electrospray Ionization Mass Spectrometry.</a> Anal Chem. 82, 982-988 (2010).</li>
<li>Nemes, P., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+ablation+electrospray+ionization+for+atmospheric-pressure%2C+in+vivo%2C+and+imaging+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Laser ablation electrospray ionization for atmospheric-pressure, in vivo, and imaging mass spectrometry.</a> Anal Chem. 79, 8098-8106 (2007).</li>
<li>Nemes, P., Barton, A. A., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+imaging+of+metabolites+in+tissues+under+ambient+conditions+by+laser+ablation+electrospray+ionization+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional imaging of metabolites in tissues under ambient conditions by laser ablation electrospray ionization mass spectrometry.</a> Anal Chem. 81, 6668-6675 (2009).</li>
<li>Nemes, P., Barton, A. A., Li, Y., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ambient+molecular+imaging+and+depth+profiling+of+live+tissue+by+infrared+laser+ablation+electrospray+ionization+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Ambient molecular imaging and depth profiling of live tissue by infrared laser ablation electrospray ionization mass spectrometry.</a> Anal Chem. 80, 4575-4582 (2008).</li>
<li>Nemes, P., Vertes, A. Laser ablation electrospray ionization for atmospheric-pressure molecular imaging mass spectrometry. Mass Spectrometry Imaging. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNemes%2C+P+%22Methods+in+Molecular+Biology%22">Methods in Molecular Biology</a>. Nemes, S. S., Rubakhin, J. V. , Springer. Volume 656 (2010).</li>
<li>Shrestha, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+analysis+of+lipids+and+small+metabolites+in+mouse+brain+tissue+by+AP+IR-MALDI+and+reactive+LAESI+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Direct analysis of lipids and small metabolites in mouse brain tissue by AP IR-MALDI and reactive LAESI mass spectrometry.</a> Analyst. 135, 751-758 (2010).</li>
<li>Nemes, P., Marginean, I., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spraying+mode+effect+on+droplet+formation+and+ion+chemistry+in+electrosprays%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Spraying mode effect on droplet formation and ion chemistry in electrosprays.</a> Anal Chem. 79, 3105-3116 (2007).</li>
<li>Nemes, P., Goyal, S., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conformational+and+noncovalent+complexation+changes+in+proteins+during+electrospray+ionization%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Conformational and noncovalent complexation changes in proteins during electrospray ionization.</a> Anal Chem. 80, 387-395 (2008).</li>
<li>Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+by+Mid-IR+laser+ablation+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Phys+A-Mater+Sci+Process%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging by Mid-IR laser ablation mass spectrometry.</a> Appl Phys A-Mater Sci Process. 93, 885-891 (2008).</li>
<li>Shrestha, B., Vertes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+metabolic+profiling+of+single+cells+by+laser+ablation+electrospray+ionization+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">In situ metabolic profiling of single cells by laser ablation electrospray ionization mass spectrometry.</a> Anal Chem. 81, 8265-8271 (2009).</li>
<li>Cooks, R. G., Ouyang, Z., Takats, Z., Wiseman, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ambient+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Ambient mass spectrometry.</a> Science. 311, 1566-1570 (2006).</li>
</ol>

无利益冲突声明。

不同类型的组织具有不同的含水量和抗张强度，这反过来可能影响样品的消融特性。9 在更换主要组织类型时，建议调整激光能量密度、样品处理方法以及分析方案，以减轻这些影响。
对于单细胞或更高分辨率的研究，可将中红外光耦合至一根尖端化的光纤，而非使用聚焦透镜。10 通过将光纤尖端置于组织中选定细胞的附近，即可在单细胞水平上进行LAESI分析。
作为一种用于常压电离质谱的无标记离子源11，LAESI 在组织中生化过程的研究方面展现出巨大潜力。凭借直接分析、横向及三维成像的附加优势，LAESI 正成为一种新兴的生物分析工具，适用于成分分析及成像应用。

<table><tbody><tr><td>质谱仪</td><td>Waters</td><td>Q-TOF Premier</td><td></td></tr><tr><td>中红外激光器</td><td>Opotek Inc. (Carlsbad, CA)</td><td>Vibrant IR</td><td></td></tr></tbody></table>

大气压分子成像技术在生物组织和生物膜的激光烧蚀电喷雾电离质谱分析中的应用

Atmospheric-pressure Molecular Imaging of Biological Tissues and Biofilms by LAESI Mass Spectrometry

质谱中的常压电离方法能够在接近天然条件的实验环境下，直接对组织或生物膜进行分析检测。激光烧蚀电喷雾电离（LAESI）便是其中一种技术，特别适用于含水样品的分析。LAESI 利用中红外激光束（波长为 2.94 μm）激发样品中的水分子。当烧蚀能量密度超过阈值时，样品材料以颗粒物形式被喷射出来，并可向上飞行至距样品表面数毫米的高度。在 LAESI 中，这些烧蚀羽流被高电荷液滴拦截，从而捕获部分喷出的样品物质，并将其化学组分转化为气相离子。通过配备常压离子源接口的质谱仪，可对来自样品探测区域（像素）所释放离子的组成进行分析和记录。通过对一系列像素点进行系统性扫描，可实现微探针分析模式下的分子成像。LAESI 质谱成像的一个独特之处在于其具备深度剖析能力，结合横向成像，可实现三维（3D）分子成像。目前其横向分辨率和深度分辨率分别约为 100 μm 和 40 μm，LAESI 质谱成像有助于探索生物组织的分子结构。本文综述了 LAESI 系统的主要组成部分，并为成功开展成像实验提供了操作指南。

激光烧蚀电喷雾电离（LAESI）是一种用于质谱分析的常压电离源。在成像模式下，中红外激光用于探测组织切片或生物膜中分子的空间分布。该技术为在接近天然实验条件下开展多种生物分析研究提供了一种新方法。

质谱中的环境电离方法可直接在接近天然状态的组织或生物膜上进行分析检测。

为了在生物组织或生物膜上进行惰性飞行时间二次离子质谱成像实验，需先准备惰性装置以确保其稳定运行。下一步是将样品安装到样品台，并确定所研究样品所需的实验条件。随后启动横向惰性分子成像实验，并利用所获得的数据生成空间分子分布图。结果显示了生物组织和生物膜的分子结构。我是来自乔治·华盛顿大学Vertus研究实验室的Peter Nemes博士。与共聚焦、光学以及质谱成像方法（如Maldi和sims）相比，该技术的主要优势在于，可在常压条件下直接对组织样本进行分析，且无需任何样品预处理。将感兴趣的组织切片直接贴附到平坦表面，例如经过化学预清洁但不含化学修饰剂的玻璃载片上。若需要，切片贴附后应立即固定到帕尔帖冷却台。使用配备低功率风扇的散热器，以促进帕尔帖冷却台的热量散失。若在潮湿环境中长时间操作（约一至两小时），需检查组织表面是否出现水汽或冰晶凝结现象。组织上的水凝结会不利地影响懒惰实验中的成像性能。如有需要，可使用室内除湿机，或将待测样本置于充满惰性气体（如干燥氮气）的环境腔室中，以防止凝结。在优化样本保存条件后，需进一步优化所用的离子源；激光烧蚀、电喷雾电离或懒惰离子源均由一个中红外激光器（简称 mid-ir）以及一系列用于光束导向和聚焦的光学元件组成。该装置还包括额外的样品支架、冷却组件、平移台和电喷雾系统。中红外消融过程中释放的部分颗粒物与电喷雾结合，形成含有样品分子和离子的带电液滴。这些液滴释放的离子由质谱仪进行分析和记录，图中所示为其进样口。在开始实验之前配置惰性设置。需要精确调整实验参数，以适应所选样品并优化离子源。首先将样品置于质谱仪采样锥孔下方15至20毫米处。在2.94微米波长和10赫兹重复频率下操作中红外激光器。将激光输出衰减至约100微焦每脉冲的能量。使用在激光波长下透明的金镜组合和聚焦透镜，将激光能量耦合到样品中。在正常入射位置，将中红外B轴置于质谱仪采样锥孔前方5至8毫米处。调节聚焦透镜位置和激光脉冲能量，以在焦点处实现所需深度的组织去除。被消融体积的尺寸。确定成像应用的像素尺寸。将纳米喷雾发射器沿质谱仪入口轴线放置，使其喷嘴与电离孔口之间的距离约为10毫米。对于电喷雾，配制含有0.1%乙酸的50%甲醇溶液用于正离子模式，或配制含有0.1%乙酸铵的50%甲醇溶液。负离子模式下，电喷雾的稳定性对成功成像至关重要。根据溶剂的选择，需要调节流速和喷雾电压，以获得稳定的喷雾。对于反应性、惰性及成像应用，电喷雾溶液中可含有反应物。使用注射泵以大约 300 纳升/分钟的流速将电喷雾溶液通过电喷雾发射器输送。若质谱仪入口保持在低电压下（例如，相对于接地电压低于约 500 伏），可通过直接向电喷雾发射器或经由金属接头施加高电压（例如 3000 伏）来产生电喷雾。通过缓慢调节惰性设置中各部件的相对距离，将电喷雾源以锥射流喷雾模式运行，以实现最高效的离子生成，同时利用光学显微镜确保激光束、发射器和喷口轴线位于同一平面，从而优化惰性离子产率。针对三维惰性成像实验，测定样品上消融坑的横向尺寸。采用单个脉冲进行消融，并利用例如光学显微镜中的Z轴层扫模式，确定体素的深度。在优化组织切片的固定条件和离子源后，即可在成像实验中进行分子成像。通过在 x 和 y 方向上以大于或等于消融光斑尺寸的步长，将组织样本在激光的焦平面内移动。空间分辨率受限于入射激光束的聚焦能力。在样品表面选择感兴趣的区域，并获取相应边界的XY坐标。选择一种网格化算法，以设定的像素驻留时间对成像区域进行光栅扫描。使用三级XS平移台及能够按照预设网格控制样品移动的软件。然后计算成像所需的总时间。启动中红外激光源，使其重复频率适合在每个像素的停留时间内，为质谱中选定的离子产生足够的信噪比。要进行惰性横向成像实验，请开启电喷雾源。确保溶液量足以满足成像所需的全部时间。现在同时开始质谱采集、中红外激光消融和表面扫描，并收集数据。当成像运行结束后，停止表面扫描、中红外激光以及数据采集。关闭激光光源，关闭高压电源，关闭注射泵，并将质谱仪设为待机模式。同时，关闭帕尔贴冷却电子设备，并关闭惰性气体气流（如已使用）。最后，将选定质荷比（MZ）值的离子强度信号相对于分析的绝对坐标作图，以获得横向或三维分子图像。这些图像来自大鼠脑冠状切片（厚度为100微米）的横向惰性成像的代表性结果。实验过程中切片保持冷冻状态，并置于干燥的氮气环境中。大脑的解剖区域与两种疟原虫在 m/z 278.59 处获得的分子图像显示出良好的相关性。该实验是在环境条件下对斑马植物叶片组织进行的三维分子成像，同时检测了其他多种初生和次生代谢物。在从顶部数第二层和第三层的黄色区域中，m/z 285.076 处的 ASCE 离子信号更强，且呈均匀分布。在其他情况下，该分布与光学图像中观察到的变异模式一致。H 经过其发展后，这种简便技术为分析化学和 B 化学领域的研究人员提供了研究含有可观水分的组织和生物膜分子组成及空间结构的途径。请注意，使用中红外激光器和电喷雾源可能具有极高的危险性。在本实验过程中，务必遵守标准的激光安全规程，并对所有电气连接采取适当的屏蔽措施。

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科研

JoVE Journal

Biology

生物学

常压LAESI质谱生物组织和生物膜的分子成像

通过使用尖端光学纤维在常压下对植物和动物细胞进行取样，利用激光烧蚀电喷雾电离（LAESI）质谱技术，在单细胞水平上开展质谱分析。...

常压下通过质谱法对单个细胞进行直接分析

二次电喷雾电离质谱法（SESI-MS）能够无需任何样品预处理即可检测挥发性有机化合物（VOCs）。本方案提供了利用SESI-MS快速（数分钟内）表征细菌挥发性有机化合物的操作指南。...

利用二次电喷雾电离质谱法（SESI-MS）表征细菌挥发性物质

解吸电喷雾电离质谱法（DESI-MS）是一种常温电离方法，可用于对包括生物组织在内的样品进行成像，且样品前处理步骤极少。通过在电离探针下方逐点扫描样品，这种基于喷雾的技术能够提供足够的空间分辨率，以分辨组织切片中感兴趣的分子特征。...

采用解吸电喷雾电离质谱法对生物组织成像

在薄层器官和肿瘤组织上进行的激光诱导击穿光谱成功检测到了天然元素以及人工注入的钆（Gd），后者来源于基于钆的纳米颗粒。化学元素成像的空间分辨率达到100...

激光诱导击穿光谱：一种用于组织中纳米颗粒成像与定量的新方法

本文介绍了对组织进行常温质谱成像（MSI）的实验方案 原位...

单探针的应用：常温条件下的质谱成像与单细胞分析

通过结合中红外激光解吸与电喷雾后电离技术，开发了一种在常压下运行的质谱成像（MSI）离子源。采用外源性冰基质作为吸能介质，以促进组织相关物质的共振解吸。本文提供了对新生小鼠整体进行红外基质辅助激光解吸电喷雾电离质谱成像（IR-MALDESI...

基于红外基质辅助激光解吸电喷雾电离（IR-MALDESI）的全身体质谱成像

本文演示了一种利用二级纳米电喷雾电离结合高分辨质谱技术，实时表征呼出气体化学成分的实验方案。...

利用高分辨质谱联用二次纳米电喷雾电离进行实时呼吸分析

本方案描述了一种基于升华法的可重复且可靠的制备福尔马林固定组织的方法，该组织用于成像质谱分析。...

福尔马林固定样本用于基于肽的基质辅助激光解吸/电离质谱成像工作流程的最佳制备方法

开发了一种新的样品制备方法，用于实现细胞与组织的共培养，以通过成像质谱技术检测小分子交换。...

利用成像质谱技术捕捉组织与细胞间的小分子通讯

本实验方案的目的是在计划使用基质辅助激光解吸电离质谱成像（MALDI...

用于MALDI质谱成像的代谢谱分析样品制备

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使用解吸电喷雾电离耦合轨道阱质谱仪进行单细胞质谱成像

了解常压LAESI质谱技术用于生物组织和生物膜的分子成像方法。该技术利用中红外激光进行样品消融，无需化学处理即可直接分析，实现高空间分辨率的分子分布可视化。

大气压分子成像技术在生物组织和生物膜的激光烧蚀电喷雾电离质谱分析中的应用

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