体内实时谷氨酸监测：基于酶包被微电极阵列的技术

将麻醉后的小鼠固定在立体定位仪上，暴露颅骨。

确定颅骨参考点，然后标记目标坐标。

在标记处钻孔，移除骨瓣以暴露脑组织，并清洁表面。

将涂有谷氨酸氧化酶的多电极阵列（MEA）和微移液管连接到立体定位仪框架上。

将参考电极放置在远离MEA的位置，同时保持其与脑组织的液体接触，以完成电路。

用谷氨酸溶液填充微量移液器。

现在，将MEA和微移液管降低至富含神经元和星形胶质细胞的脑组织中，记录MEA的基线电信号。

注入谷氨酸溶液，以快速提高含有MEA的细胞外空间中的谷氨酸水平。

MEA上的谷氨酸氧化酶氧化谷氨酸，产生电信号。

由于星形胶质细胞摄取谷氨酸，细胞外谷氨酸水平降低，信号随之减弱，从而实现对谷氨酸的实时监测。

在此操作中，将动物置于立体定位仪中，并使用气动夹具固定其头部。确保动物已固定稳妥，头部不会移动。然后，使用无菌棉签涂抹眼药膏。接着，用修剪器剃除头部毛发，并用小型手术剪剪去耳部附近的毛发。随后，交替使用碘酒和酒精对头皮进行三次消毒。之后，在头皮正中做一切口，并将皮肤撑开。

用无菌棉签吸去血液，并涂抹过氧化氢以帮助显露前囟和后囟。通过测量前囟和后囟的背腹向和内外侧坐标，确保头部位置正确。将前囟的坐标设为零，标记目标坐标。接着，在标记周围进行钻孔。然后，将微电极阵列（MEA）连接至头部固定装置。用第一种所需溶液回填移液管。务必在移液管中留出一段无溶液的空隙，以便观察正在排出的溶液。

然后，将导管连接到玻璃微电极上。在脑表面定位前囟（bregma）位置，并将立体定位仪的坐标设为零。移动微电极阵列（MEA）至目标坐标，缓慢下放，直至电极尖端接触脑组织。接着，将背腹向坐标归零，再缓慢将MEA插入脑内。将参考电极置于远离MEA的区域，但仍需保持与脑组织的液体接触，以形成完整电路。在记录程序中，点击选定已校准的电极，然后点击“开始实验”以启动记录。

获得稳定基线后，将压力注射器设置为0.6秒和0.5 PSI，按下压力注射器上的红色按钮进行注射。在注射记录表上记录时间、压力以及注射体积刻度的变化，必要时添加备注。随后，取下连接微移液管的MEA。用洗眼液冲洗，并在PBS中浸泡过夜，直至所有血液完全清除。