检测狂犬病病毒感染小鼠脑组织中的病毒蛋白

在设定的死后时间点采集感染脑内狂犬病病毒的小鼠的固定脑切片。 

该病毒可感染大脑皮层中的锥体神经元，表达的病毒蛋白定位于细胞质内称为包涵体的颗粒状结构中。

用氯化铵处理切片，以中和固定过程中产生的反应性基团，并尽量减少背景染色。

将切片浸入过氧化氢中，以灭活内源性过氧化物酶并降低非特异性信号。

加入含有去污剂的封闭液，以通透细胞膜并封闭非特异性结合位点。

用针对病毒蛋白的特异性一抗进行孵育。

使用与一抗结合的生物素标记的二抗进行洗涤和孵育。

再次洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，该亲和素可与生物素结合，随后加入酶促反应的显色底物，该底物被酶转化为有色产物。

使用显微镜观察含有病毒蛋白的免疫反应性包涵体。

随着死后时间的延长，神经元退化和包涵体消失的现象变得明显。