制备大鼠脑组织切片用于血脑屏障完整性的透射电镜分析

取一只右脑半球血流受限的大鼠，导致血脑屏障受损。

静脉注射荧光标记的白蛋白，该白蛋白可穿过受损的血脑屏障进入脑组织。

获取化学固定的脑切片。

加入封闭缓冲液以防止非特异性抗体结合。

加入针对荧光标记白蛋白的辣根过氧化物酶偶联抗体。

加入一种显色底物，该底物被过氧化物酶转化为电子致密的沉淀物。

引入四氧化锇以固定膜脂质并增强对比度。

用浓度递增的酒精对切片进行脱水。

加入醋酸铀，其可结合核酸和蛋白质以增强对比度。 

使用浓度递增的酒精再次进行脱水，最后用环氧丙烷处理以进行树脂包埋。将切片包埋于树脂中。

在显微镜下识别并切除染色原染色的区域。

将这些切片重新包埋于树脂中，并制备超薄切片。

将切片置于透射电子显微镜（EM）载网上。

用柠檬酸铅染色以增强细胞外基质的对比度。

继续进行电子显微镜检查以评估血脑屏障的完整性。