脑组织中病原体的免疫组织学检测

取经福尔马林固定并包埋于石蜡中的人脑组织。该组织中可见病原微生物存在于细胞内及细胞外。

洗涤以去除石蜡，然后使用浓度递减的酒精对组织进行再水化。

使用酸性缓冲液加热，以破坏甲醛诱导的蛋白质交联，从而暴露细菌上的抗原表位。

加入氯化铵孵育，以中和固定过程中产生的残留活性醛基，防止其与抗体发生非特异性结合。

使用去垢剂处理，以通透细胞膜，促进抗体渗透。

加入封闭液以防止非特异性抗体结合。

使用靶向细胞外和细胞内微生物的一抗进行孵育。

加入与一抗结合的荧光素标记二抗。

加入荧光DNA结合染料以染色细胞核。

使用自发荧光消除剂处理，以淬灭来自自发荧光细胞内颗粒的荧光，最大限度降低背景信号。

使用荧光显微镜观察组织，以确认微生物的存在。