使用 Western Blot 分析检测小鼠脑样品中的磷酸化 tau 蛋白

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从含有蛋白酶抑制剂和去污剂的提取缓冲液中的小鼠脑组织开始。

匀浆组织以将蛋白质释放到缓冲液中。蛋白酶抑制剂阻断蛋白酶活性,防止蛋白质降解。

离心并收集含有蛋白质的上清液。

添加含有去污剂和还原剂的上样缓冲液以使蛋白质变性。

将对照和样品中的蛋白质上样到 SDS-PAGE 凝胶上。施加电场将蛋白质分离成不同的条带。

电泳后,将蛋白质条带转移到膜上。

用含有脱脂牛奶的缓冲液处理膜,以阻断非特异性相互作用位点。

与与磷酸化 tau 蛋白特异性结合的一抗一起孵育。

洗涤并与酶偶联的二抗一起孵育。

添加与酶反应产生光信号的底物,确认磷酸化的 tau 蛋白。

与对照组相比,样品中的强发光带表明神经退行性病变。

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Last updated: 25 July 2026