利用蛋白质印迹法检测小鼠脑组织中错误折叠的朊蛋白聚集体

取自哺乳动物脑组织的匀浆，其中含有正常的朊蛋白以及导致神经退行性疾病的错误折叠朊蛋白聚集体。

使用蛋白酶孵育，以消化正常朊病毒，保留抗性聚集物完整。

使用变性缓冲液在高温下处理聚集体，以使蛋白质线性化并赋予其均匀的负电荷。

将样品上样至电泳凝胶，通过蛋白质条带的分离来确认聚集体的存在。

利用电场将分离的蛋白质转移至膜上。

将膜置于封闭液中孵育，以封闭非特异性结合位点。

加入辣根过氧化物酶标记的抗体进行孵育，该抗体可特异性结合朊病毒聚集体。

洗涤膜以去除未结合的抗体，最大限度地减少非特异性信号。

加入化学发光底物和氧化剂，使过氧化物酶能够氧化底物并产生光信号。

通过测量光强度来定量均质液中错误折叠的朊病毒。