脑损伤小鼠视神经轴突损伤的电子显微镜分析

在损伤后特定时间点分离具有脑损伤的转基因小鼠的视神经。该神经包含表达荧光蛋白的神经元。

利用荧光显微镜观察受损神经，可见其轴突肿胀和断裂现象逐渐增加。

固定组织以保存细胞结构。

用缓冲液冲洗组织以去除多余的固定剂。

使用与髓鞘脂质结合的锇-亚铁氰化物溶液处理，以增强成像对比度。

冲洗组织，然后在重金属化合物中孵育，该化合物可与大分子结合并增强对比度。

使用浓度递增的酒精对组织进行脱水，并将其包埋在树脂中。

获取横切面和纵切面，并用重金属化合物处理，以提高对比度。

在电子显微镜下，纵向切面显示轴突肿胀逐渐发展，伴有肿胀的线粒体聚集、囊泡、膜出泡以及细胞骨架结构的破坏。

横切面显示髓鞘逐渐破坏，提示轴突变性。