聚焦离子束扫描电子显微镜用于突触连接神经元的三维重建

取一段显示神经元轴突和树突的小鼠大脑皮层组织切片。树突具有突起，称为树突棘，可与轴突形成突触。

将组织与四氧化锇-铁氰化钾溶液孵育，该溶液可结合脂质，随后再次应用四氧化锇，以增强成像的结构对比度。

使用可结合大分子并增强对比度的重金属化合物进行染色。

采用浓度递增的酒精进行脱水，以便进行树脂包埋。

将组织包埋于树脂中，固定在样品 holder 上，并镀上一层金以优化成像质量。

利用聚焦离子束扫描电子显微镜进行三维成像。

使用离子束去除一层薄的树脂包埋组织，暴露出成像表面。

将电子束聚焦于暴露的表面，并检测背散射电子以生成图像。
 
进行连续切片与成像，并重建三维图像，揭示出突触连接的大脑皮层神经元网络。