开发自定义的中国仓鼠卵巢宿主细胞蛋白检测使用声膜微粒子技术

该程序的总体目标是创建定制的、稳健的免疫测定，以有限的手动作时间获得可重复的结果。这是通过首先准备适当的检测组分来实现的。该程序的第二步是根据检测参数优化检测。

该程序的第三步是在 Vibe 平台上设置分析，只需加载样品和试剂板并定义分析程序即可。使用 Vibe 软件时，该过程的最后一步是使用启动向导启动 Vibe。最终，通过使用 Vibe 平台，可以获得使用定制抗体获得灵敏、可重现的免疫测定结果，并且手动作时间有限。

与 Eli 等现有方法相比，这项技术的主要优势在于，Vibe 工作站根据标准协议提供无人值守作和更具可重现性的数据。使用 NHS 显色生物素 Bio atin，将生物素化抗体连接到链球菌上、吸附到磁珠上的捕获抗体，首先将小瓶剥离液吸附到吸附磁珠上 1 到 2 分钟，然后重悬，将所需体积的磁珠移液到离心管中，并在磁分离器的帮助下去除沉淀物。根据书面方案，使用 PBST 使用磁分离洗涤珠子 3 次，以回收珠子。

从最终洗涤液中去除 PBST 后，将生物素化抗体溶液添加到珠子中，并通过移液重悬珠子。确保抗体体积至少为 300 μL。如果较少，请使用 PBS 进行调整。

将悬浮液在室温下搅拌孵育 30 分钟。然后像以前一样用 PBST 洗涤珠子。根据与之前相同的程序添加生物素化的 BSA。

当生物素化抗体在 PBS 中洗涤并重悬于 100 μL 0.05% BSA 的 PBS 中进行长期储存时，可根据标准方案添加叠氮化钠。使用 NHS 荧光素氟化检测抗体。开始中国仓鼠卵巢宿主细胞蛋白测定开发。

首先，准备工作解决方案。将 HAPTEN 标记的抗体或 HAB 制备为 1.6 μg/mL 的 4 x 工作溶液，用生物级微珠 HAB 稀释剂稀释，旋转溶液至少 5 分钟。接下来，准备微珠溶液。

充分涡旋珠子原汁液。为确保所有珠子都处于悬浮状态，取出等分试样，制备每密耳 8 乘以 10 至 5 个珠子的 4 x 工作混合物，用生物级珠子 HAB 稀释剂稀释。旋转溶液至少 5 分钟。

然后准备电泳缓冲液。已经开发了几种使用 10 毫摩尔的 CHO HCP 测定。he 片缓冲液 1%吐温 pH 7.5。

但是，缓冲液可能需要针对用于开发检测的抗体进行优化。建议为每 5 个工作站的分析准备一个分析模板。分析模板有七张纸、标记说明、样品设置说明、原始数据计算、校准图表和结果。

要开始设置模板，请选择样品设置表并填写表中标准品的浓度范围。在工作表的左上角，在标准品右侧的表格中输入其他信息，以指示 vibe 工作站、样品需要孵育多长时间、要转移多少试剂、样品积累的时间长度以及是否需要对探针和小柱进行传感器调节和去污。然后填写板布局，用 Bio Scale 样品稀释剂稀释校准品和样品，并将样品加载到板中。

将试剂加载到第三个 96 壁板中。密封板。将板放在工作站台面摇床上，并使用洗涤缓冲液和再生溶液设置系统。

打开 vibe 工作站并连接系统供应和废液。开始灌注系统。插入 vibe 盒式磁带。

最后，运行检测启动向导。按照屏幕上的说明开始 使用 A MMP 技术测量检测信号。当微珠抗原 HAPTEN 抗体通过半抗原抗半抗原相互作用与传感器结合时，再生通过去除免疫复合物使传感器恢复到起始状态。显示。

这是 CHO H-C-P-A-M-M-P 测定的示例。可以在生物反应器样品中进行校准曲线分析，并获得可重现的结果。该校准曲线适用于残留蛋白质。

使用 vibe 残留蛋白（一种检测试剂盒）进行的 A-A-M-M-P 检测。同一试剂盒可用于 30 分钟孵育期的快速分析，或用于更灵敏的结果和更宽的动态范围和更长的孵育期。Vibe 工作站还可用于产品滴度分析，其执行方式与其他 A MMP 分析不同。

该检测不需要样品处理或磁珠，并且已在含有超过 1000 万个细胞的无离心样品中验证了定量。此处显示的是 Vibe 生物分析仪或 Alpha 筛选技术在 Vibe 平台上使用重组 GST GAD 34 结果获得的信号标准曲线。这里的日志更敏感。

存在或不存在 bate 蛋白酶体抑制剂的情况下，通过 Vibe、生物分析仪或 Alpha 筛选分析，检测 CWR 22 异种移植物对 GAD 34 的诱导。Vibe 平台能够在体内肿瘤异种移植物中产生灵敏、可重复的结果，而 α 筛选信号在其发育后随着微克蛋白质的增加而被淬灭。这项技术为肿瘤药物发现领域的研究人员探索肿瘤样本中的药物抑制铺平了道路，并允许在生物工艺应用中进行更高效的作。