测量小鼠的运动协调能力

本实验的总体目标是测量小鼠的运动协调能力。首先通过加速转杆实验进行测试，随后在方杆上进一步检测运动协调能力。

也可以在静态杆上对动物进行测试。最后，可以测量其在平行杆上的表现。最终可获得结果，以显示小鼠是否存在运动协调功能障碍。

通常，初次接触该技术的研究人员会因难以正确地将小鼠放置于仪器上而在以下所有测试中遇到困难。在测试前5至20分钟将小鼠带入实验室内，以确保其完全清醒。此处的转棒实验场景由牛津大学构建。

该杆直径为3厘米，表面有一系列平行的凸起，有助于小鼠更有效地抓握。杆的两侧各有一个凸缘，可防止小鼠脱离杆体。凸缘直径为30厘米，相距6厘米。

将杆固定在装置底座上方30厘米处。在底座处放置柔软的垫子，以缓冲试验开始前可能发生的跌落。通过设置起始转速为每分钟4转、加速度为每分钟20转，来准备旋转杆。

首先，抓住小鼠的尾巴，将其以低于水平方向45度的角度朝向杆子提起。当小鼠接近杆子时，迅速将其释放。或者，可先将小鼠轻轻放在一根小棒上，再通过移动小棒将动物转移至杆子上。

将小鼠放置于转棒上10秒后开始加速，并记录小鼠掉落时的速度。若小鼠在5秒内掉落，可能由于实验操作者放置不当所致，此时不应记录结果；若在10秒内掉落，应重新开始试验。记录时间，并让动物再进行两次尝试。

对于停留时间超过10秒的动物，记录其坠落时的速度。有时小鼠可能会停止行走，从而在杆上挣扎一段时间后才最终坠落。记录该现象发生时的速度具有重要意义。

性能计算为各次试验之间的平均速度。例如，一只小鼠第一次在10秒前掉落，第二次则坚持到每分钟12转。第二次得分为四加十二除以二，等于每分钟8转。

水平杆用于测量后肢力量和协调性，最常用的是直径为2毫米的杆。直径较大的杆可能提供更精确的性能评分。长38厘米的黄铜杆由木质支撑柱固定，位于实验台表面以上49厘米处。

将横杆安装到略微靠拢的支撑架凹槽中时，横杆处于张力状态。从2毫米横杆开始测试。抓住小鼠尾巴，将其放置在仪器前方的台面上。

迅速向后滑动约20厘米，使动物身体快速与横杆垂直。提起动物，使其仅用四肢的爪子抓住横杆中央。

在释放尾巴的同时立即启动秒表。如果小鼠未能抓住横杆，且实验者的操作可能是导致原因，则不记录跌落时间，并在短暂休息后重新测试该动物。

如果小鼠在5秒内掉落，且显然并非由于实验人员放置不当所致，可重复最多三次，以获得超过5秒的得分。记录小鼠掉落的时间，或记录直到小鼠任意一只脚接触柱子的时间，最长测试时间为30秒，取最佳成绩作为数据用于评分水平横杆。如果小鼠在1至5秒之间掉落，记为1分；在6至10秒之间掉落，记为2分。

在11秒至20秒之间落下得2分；在21秒至30秒之间落下得3分；30秒后落下，或坚持到30秒仍停留在横杆上，得4分。

得分为五分，如果小鼠接触到末端，同样也得五分。在测试期间可随时使用其四个端口进行支撑。若动物在两毫米直径的横杆上达到五分，则可在短暂休息后测试更粗的横杆。

四毫米和六毫米横杆的评分标准与两毫米横杆相同，最终得分为累计总分。因此，若一只小鼠在两毫米横杆上得分为5分，但在四毫米横杆上13秒后掉落，则其得分为5加3等于8分。

在该运动协调性测试中，将直径分别为35、28、22、15和9毫米，长度均为60厘米的木棒或木杆，用G形夹固定在距地面60厘米高的实验台架上。在靠近台架一端的木棒上距末端10厘米处做一标记，作为终点线。开始时，将小鼠置于最粗木棒的远端，使其背向台架，记录小鼠转向朝向台架所需的时间以及通过全程的总时间。

如果小鼠在定位过程中翻转至倒挂状态并抓握在杆下方，则任意将其赋值为最高分120秒。该动物不再在其他杆上进行测试，并同样获得最大通行值。如果小鼠在定位后坠落或达到120秒的最大测试时间，则不再在更细的杆上对其进行测试。

如果小鼠在横穿转棒过程中翻转至倒置状态，则给予最高分，将小鼠放回饲养笼，使其休息后再进行测试。接着使用下一个直径更小的转棒。将动物放置在更小的转棒上，操作方式如前所述。

如果小鼠在五秒内掉落，则将其放回，并允许最多再尝试两次。记录小鼠翻转身体的时间，或直到小鼠掉落为止。搭建平行杆时，将两根长一米、直径四毫米的杆置于木制支架上，杆间距离为30毫米。

将柱子置于距地面60厘米的高度。将小鼠放置在两根横杆的正中央，使其长轴与横杆垂直。两只前爪应位于同一根横杆上，两只后爪则位于另一根横杆上。

评分方法与静态杆类似。记录两个指标：小鼠转向起始位置90度所需的时间，以及小鼠到达任一末端支撑点所需的时间。同样，小鼠在完成转向和通过过程中不得翻转身体，否则记为达到最长时限。

如果动物在五秒内掉落，则可能是由于放置不当，应重新测试。最初使用静止杆来监测突变小鼠在有或无环境富集条件下的疾病进展。富集方案显著延迟了小鼠在杆上的运动功能障碍的发生，这一效果与后肢抓握异常出现时间的延迟相一致。

神经功能异常的一般表现是，感染的小鼠在注射后第16周开始出现横杆实验性能下降，从第18周起在转棒实验中表现下降，从至少第19周起在静态杆实验中表现下降。海马病变对任何运动能力指标均无影响，但在转棒和静态杆实验中，129Sv小鼠相较于C57BL/6小鼠在发育完成后表现出运动功能受损。该技术为亨廷顿病研究领域的科研人员提供了研究环境富集对亨廷顿病突变小鼠影响的途径。