基本外科技术，在哥廷根微型猪:气管插管，膀胱导尿，股血管的导管和Transcardial灌注

每当小型猪接受全身麻醉以进行手术时，应实施气管内插管，以保持气道通畅、便于辅助通气，并防止分泌物误吸入气道。小型猪可在多种体位下进行插管，但将动物仰卧放置通常更便于常规进行人类插管的操作者操作，因为该体位使气道的暴露方式与人类相似，同时也便于实施辅助通气。气管内插管所需的设备包括开口用吊带、低压吸引装置（配钝头）、长度在17至25厘米之间的直板兽用喉镜、导丝、用于充气的注射器、听诊器以及胶布。

适用于成年猪的剖腹术和小型猪。气管插管的尺寸应为5至7毫米。本视频中使用了5.5毫米的插管。

将迷你猪仰卧放置并妥善固定。为确保喉部通道保持平直，由助手轻轻拉出舌头并撑开下颌。注意不要过度旋转头部，避免气道受压或头部过度后仰，否则可能导致气道阻塞，使喉部开口更难识别。

喉镜用于下压舌体，同时吸引管的尖端用于将会厌从软腭处推开。然后使用喉镜的尖端将会厌向上推起，朝向舌根方向，从而暴露喉部开口。随着杓状软骨的张开，声带随之显现，此时将气管导管轻柔地稍加旋转推进至气管内。

在呼气过程中，根据制造商的说明给导管套囊充气。注意避免过度充气，以免引起气道肿胀和水肿。猪有一支支气管专门用于通气右前肺叶，因此将导管放置在气管分叉上方至关重要。

这可以通过使用合适尺寸的导管，并用胶带在吻部水平固定导管近端来实现。当迷你猪正确插管后，应能感觉到气体自由通过导管，听诊胸部时，胸廓左右两侧均应可闻及呼吸音。将呼吸机与监测系统连接至迷你猪后，应可测得生理性的呼气末二氧化碳值，并可观察到与呼吸机设定参数所决定的呼吸模式相一致的二氧化碳波形曲线。

迷你猪的气管插管可能具有挑战性，因为其喉部通道狭窄，且声带的黏膜容易受到损伤。如果使用过大的导管或施加过大的力量，可借助利多卡因喷雾或肌肉松弛剂来帮助导管插入。但神经肌肉阻滞剂的使用仅应由对此类操作经过良好培训的人员进行。

膀胱导尿可用于监测尿液生成，这在长时间手术过程中可提供有关水合状态以及肾脏和心血管功能的有用信息。通过尿道进行膀胱导尿在雌性猪中较易操作。尽管该操作在成年小型猪雄性个体中极为困难，甚至可能无法完成，但由于其尿道外口的曲度和大小，使用8或10号法国尺寸的弗利导尿管较为合适。

使用导丝打开导管更为理想。所需设备包括窥器、钝头镊子、装有生理盐水润滑剂的注射器以及密闭式尿液引流袋。为了在导尿过程中更好地观察外尿道口，应将小型猪仰卧放置，并在腰部区域下方提供支撑。

当助手将后肢向头侧牵拉时，雌性动物的尿道外口位于阴道底部，距离宫颈约三分之一至二分之一处。然而，由于动物呈仰卧位，尿道外口的位置看起来呈倒置状态。使用钝头镊子控制导管，使导管尖端与镊子保持同一直线。

小心地将导管插入尿道口。如果在导管插入过程中用力过大，尿道容易受到损伤，但导管通过尿道外括约肌时，最初可能会感到轻微阻力。如果该问题持续存在，可能表明动物镇静深度不足。

解决方法是等待片刻，使麻醉发挥效果。当导管到达膀胱时，移除导丝，即可看到尿液流出。根据制造商的说明，用生理盐水充盈气囊，并轻轻向外牵拉导管，直至气囊卡在膀胱颈部。

连接密闭式尿液引流袋，并用胶带将导管固定在尾巴上，以避免导管意外移位。在具备适当培训和经验的情况下操作动物时，经尿道膀胱插管可顺利进行。这种微创操作可防止精密医疗设备被污染以及避免引起疼痛的膀胱扩张，后者可能因迷走神经张力升高和生理参数改变而对动物造成伤害并影响实验结果。

动脉和静脉插管可用于多次采集血样以及监测各种生理参数。在进行存活实验的血管插管操作时，必须采用严格的无菌技术，以避免感染。所需设备包括手术刀、钝头剪刀、手术剪、组织镊、小型钝头器械、手术镊、小型自持式组织牵开器、持针器、手术棉签、带针缝线，以及肝素化生理盐水作为冲洗液以维持导管通畅。

两根18号静脉留置针，两个2-4法式带导引器和Seldinger导丝的亮头鞘管。通过检测趾间疼痛反射来评估麻醉深度。将迷你猪仰卧位固定，并将后肢向外侧牵拉，以接近股动脉和股静脉。

在缝匠肌与股薄肌之间的皮肤皱褶处，辨认出浅表内侧隐动脉搏动消失的位置。在此位置近端做一纵向浅表皮肤切口，以避免意外损伤内侧隐动静脉。使用钝头剪刀分离其下方的皮下组织。

在隐股静脉穿刺点近端，将缝匠肌和股薄肌的筋膜分开。首先使用小的钝头手术镊，然后用手指分离这两组肌肉，并用小型自持式组织牵开器牵开，注意避免损伤股神经和血管；分离出长约一到两厘米的动脉。采用钝性分离技术，旋转斜面静脉留置针，使其管腔朝向上方。

稍微弯曲针头，以便更顺利地沿血管的曲率行进。注意测试针头是否仍能前后移动。动脉已被穿刺。

针头回撤后，将Seldinger导丝经套管插入。在轻轻按压动脉以确保导丝固定的同时，移除静脉套管。将带导入器的鞘管沿导丝插入并推进至目标位置，随后移除导入器及导丝。

股静脉位于动脉的稍下方和内侧。通过钝性分离暴露静脉后，按照先前所述的动脉插管方法对静脉进行插管。为确认动脉和静脉均正确置入导管，可从两根鞘管中抽血，并比较血液样本的颜色。

每次采集血样后，务必用肝素化生理盐水冲洗导管。为保持导管通畅，需将导管固定，并缝合皮肤。通过数针缝线，可将血管环置于动脉和静脉周围，以便在穿刺前固定血管。

尽管该方法具有一些优势，但我们通常避免进行这一额外步骤，因为它需要对血管进行过多解剖，从而增加损伤股深支和外侧支的风险。本视频展示了如何对股血管进行插管。相较于颈部血管，股血管插管更易于操作，因此更具优势。

在进行涉及框架式立体定位神经外科手术和脑成像的实验时，经心灌注是最有效的固定方法，可获得最佳结果。在准备小型猪器官用于组织学和组织化学分析时，该操作需要以下设备：灌注系统及相关灌注液、静脉套管注射器、戊巴比妥、手术刀、钝头剪刀、骨剪以及两把大型自持式止血钳，其中至少一把应带有弯曲尖端。

自持式胸骨牵开器并非绝对必要，但可显著简化操作。经心灌注必须在通风良好的房间内进行，并配备高效排烟系统，以及能够收集大量液体和血液的设施，以便后续安全处理。注射致死剂量的戊巴比妥后，检测趾间疼痛反射。

通过正中胸骨切口可获得对心脏和主动脉的最佳显露。做一自胸骨柄至剑突的纵行深部皮肤切口。在剑突下方的膈肌处做一小切口，进入胸腔。

将骨剪插入胸腔，沿中线切开胸骨。进行此操作时必须小心，因为心脏某些部位可能与胸骨内侧粘连。胸骨切开后，置入自持式胸骨牵开器以打开胸腔。若心包仍完整，先在心尖处的心包上做一小切口，然后用手指钝性分离打开心包囊。辨认左心室、右心耳及主动脉。

与上腔静脉一同，在心脏心尖附近做一个小的浅表切口，使用钝头器械穿刺心肌，进入左心室。将灌注导管插入左心室内，并将导管尖端向头侧推进至主动脉。当在主动脉内用第二和第三根手指触及导管时，用夹子固定导管位置。

使用自持式弯头镊子，切开右侧耳缘静脉，并开始通过灌注套管注入固定液。当灌注液持续流入迷你猪的血管系统时，可在主动脉处感受到强烈的液体流动，同时血液会从切开的右侧耳缘静脉大量流出。注意观察，当使用多聚甲醛进行全身灌注时，由于醛类物质对神经和肌肉的交联作用，可引起四肢强直性伸展以及浅层肌肉组织的抽搐。

使用压缩空气驱动的灌注系统时，务必在储液罐排空前取下套管或夹住透明硅胶管，以避免空气进入血管系统。在本视频中，我们采用由压缩空气驱动而非重力驱动的灌注系统。利用压缩空气的系统优势在于，灌注过程中施加的静水压保持恒定，从而实现最佳的器官灌注效果。