2011年7月2日
Fopius arisanus 是一种寄生在实蝇科果实蝇卵和幼虫阶段的寄生蜂,已被成功用于这些重要热带害虫的生物防治。本文介绍了一种利用 readily available materials 小规模人工繁殖 F. arisanus 的优化方案。
FOIA Aus 是夏威夷一种重要的生物防治剂,因为它能攻击粉斑实蝇,而粉斑实蝇是热带地区严重的经济害虫,尤其在夏威夷危害严重。FOIA Aus 的优势在于它能攻击害虫的卵期,从而在早期阶段控制害虫。在接下来的视频片段中,您将能够看到在实验室条件下饲养 FOIA Aus 的近距离画面。
在本节目的最后,您将看到有关这种特定寄生蜂如何在法属波利尼西亚成功实施释放项目的讨论。我们的实验方案将从准备就绪、可寄生入宿主果蝇卵内的成年寄生蜂开始。第一步是准备用于提供给寄生蜂的果蝇卵。
接下来,果蝇幼虫被允许孵化、发育并化蛹。当果蝇达到蛹阶段后,根据体型大小进行分选以富集寄生虫。最后,寄生虫羽化并被饲养至成熟。
然后它们相遇,并再次准备进入下一代水果中产卵。果蝇卵。至此,完成一个生命周期。
准备果蝇产卵用的基质。通过制作边长约10厘米的螺旋状基块来培养果蝇卵。每升水中加入9克螺旋粉配制该基质。
使用水平表面,将液体琼脂倒入培养皿中至边缘,静置至少45分钟使其凝固。待琼脂块完全凝固后,在每块琼脂表面覆盖一层滤纸。由于琼脂表面有水分,滤纸应能轻易粘附在琼脂上。
第二次滚动。将果蝇卵接种到螺旋块的覆有组织的表面。每0.5毫升悬浮液中的果蝇卵可获得每个模块约6,000个卵。
使用一把宽2.5厘米并蘸水的画笔,将果蝇卵均匀地铺在组织表面。随后将果蝇卵置于寄生蜂培养笼的下层筛网下方,以允许寄生蜂进行产卵寄生。轻敲筛网底部可去除可能阻碍果蝇卵的死亡寄生蜂。果蝇卵可让寄生蜂在其中过夜产卵寄生。
大约21小时足以使大部分果蝇卵被寄生。暴露时间过长则存在超寄生的风险。暴露后饲养果蝇卵所需的主要组分包括果蝇幼虫饲料、幼虫饲料容器和化蛹容器。
将三至三个半已制备好的寄生卵螺旋块放置于1.25升的果蝇幼虫饲料上。将盛有卵的饲料容器置于垫高架上,并在一层厚度为1.5厘米的细级蛭石或洗涤砂上方放置化蛹容器。
用美纹纸胶带封好化蛹容器的边缘。确保饲料容器顶部与化蛹容器盖子之间留有足够空间,以便幼虫爬出并落入下方的蛭石中。将化蛹容器转移至温度为27°C、相对湿度为80%的房间中,放置一周。
一周后,前四天用厚布盖住容器。打开化蛹容器,移除幼虫饲料。我们使用 Bre Dorsals 作为宿主果蝇来饲养 foia Airis。
该属中其他物种以及Asfa和sitis属的物种也可能是潜在寄主。如果蛭石中有未羽化的幼虫,请让其在筛子中过夜化蛹。从蛭石中分离蛹时,应使用粗筛和较大的容器开始操作。
接下来,使用手动筛网去除蛭石中任何残留的结块以及含有蛹的果蝇。可通过大小将部分被寄生的果蝇与未被寄生的果蝇初步分离。根据先前的研究,我们仅收集直径在 1.65 至 2.26 毫米之间的蛹,这些较小的蛹主要含有发育不良的寄生性天敌。
较大的果蝇主要包含苍蝇。可采用多种方法对蛹进行按大小分选。我们将介绍一种机械方法,使用定制尺寸的分选器对采集的寄生果蝇进行分选。
雌性个体的比例随体型增大而增加。将样品放入机械分级筛顶部的漏斗中,振动进料器将其输送至一对呈30度角略微发散的滚轴顶部。样品逐个落入一系列槽口中,并通过漏斗分别进入10个独立的收集容器中。
将大小在1.65毫米至2.26毫米范围内的寄生蛹放入羽化笼中继续培养七天,直至大多数果蝇从被寄生的蛹中羽化出来。接着,使用风扇将空的果蝇蛹壳与仍含有活体寄生蜂的蛹壳分离开来。为维持Opia Aus种群,使用带有可拆卸玻璃前板的寄生蜂饲养笼,每边长度约为25厘米。
笼子的顶部和两个侧面有一平方毫米的筛网。笼子背面覆盖有橡胶片,留有一个九厘米的孔洞用于进出。笼子底部有开口,内侧覆盖有一至两平方毫米的筛网。
容器需足够大,以便放置两个带有果实和果蝇卵的螺旋钻块,用于寄生蜂的寄生操作。饲养笼的玻璃前壁底部四分之一区域应带有 tinted(着色)部分,以减少寄生蜂在笼前部的聚集。将约 11 克选定的 aria 放入直径约 9 厘米的塑料容器中。
这应产生每笼约600至700个寄生蜂。大小筛选后应得到约60%的雌性。将筛网盖子固定在容器上。盖子应覆盖面积为2平方毫米的筛网,以便果蝇羽化后可以离开容器,同时防止残留的果蝇逃逸。
将寄生虫维持在24摄氏度、相对湿度约45%的环境中,光照周期为12小时光照/12小时黑暗,并保持良好通风。每周至少三次或在现有蜂蜜干燥时,用指尖将旋转蜂蜜以细条状涂抹在笼子顶部。注意:若涂抹过厚,蜂蜜会滴入笼内;若涂抹过薄,蜂蜜会迅速干燥,需频繁补充。在笼子顶部放置螺杆块(尺寸为10厘米见方、深4厘米),为寄生虫提供湿度。
这些培养块应每周更换两次。2001年,我们获得了一笔小额种子基金,旨在探索能否将生物防治手段引入法属波利尼西亚,以缓解当时的局面,因为当时东方果实蝇正导致所有热带水果遭受难以置信的严重侵染。位于夏威夷的这个实验室,我们共进行了10次运输。
因此,每一批次的运输通常包含约十万只带菌的东方果实蝇,实际上数量还要多一些。我们会将内部含有寄生蜂的东方果实蝇个体连同防护装备一起运送,然后使其羽化。我们在塔希提岛建立了一个小型实验室,接收这些材料,随后使《信息自由法》空气病原体(FOIA Air Sanus)羽化。在大约一年的时间内,我们累计释放了近一百万只FOIA Aans。
总体而言,这是夏威夷以外最成功的案例。当FOIA Aus最初在夏威夷释放时,它成为整个太平洋地区实蝇生物防治的最佳范例。在过去10年中,Bactrocera dorsalis复合种在全球范围内迅速扩散。
因此,Bactrocera Carbo 已传播至南美洲的苏里南,目前在巴西北部也有发现。此外,另一种名为 Bacter Inance 的物种已蔓延至整个非洲,造成了各种严重危害。同时,细菌性木瓜病(bacter papaya)也在不断扩散。
因此,这一成功现在为在南美洲、非洲以及其他亚洲地区释放这些FOIA Aus创造了机会。
Fopius arisanus 是一种寄生蜂,主要针对实蝇科果实蝇的卵-幼虫阶段,而实蝇科果实蝇是热带地区重要的农业害虫。本文介绍了一种利用易得材料小规模饲养 F. arisanus 的优化方案。
建立如 Fopius arisanus 等寄生蜂的可靠实验室种群,对于推进针对造成重大经济损失的实蝇科果实蝇类的生物防治计划至关重要。通过优化饲养方案,可稳定生产生物防治制剂,从而提高靶标验证的可预测性,降低害虫管理策略中机制性风险,支持农业生物技术 pipeline 从发现到临床前评估的转化连续性。
该饲养方法通过支持早期发现阶段的假设验证、通过标准化寄生蜂生产推动检测方法开发,以及通过寄主范围验证为转化研究提供依据,从而融入发现研究的全过程。