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生物学
0 次观看 • 3:50 分钟 • April 30th, 2023
首先,注射东莨菪碱和特布他林溶液,以减轻毛果芸碱的外周副作用。接着,注射毛果芸碱溶液以诱导癫痫持续状态(status epilepticus, SE)。毛果芸碱将改变大脑神经元的兴奋性。
随后立即将小鼠放入预热的培养箱中,并监测癫痫持续状态(SE)的诱导情况。观察小鼠是否出现点头动作、前肢节律性运动,或任何达到Racine分级3级或以上的行为表现。接着将小鼠转移至室温培养箱中,并持续监测其行为变化。
接下来,注射地西泮溶液以终止癫痫持续状态(SE)。最后,注射葡萄糖溶液以促进动物恢复。在癫痫持续状态诱导结束后,动物将进入一段无癫痫发作的潜伏期,直至自发性复发性癫痫发作开始。
首先称量每只8周龄雄性小鼠。配制每千克体重2毫克的东莨菪碱和特布他林,以及每千克体重280毫克的匹鲁卡品溶液。然后将溶液腹腔注射至每只小鼠体内,并将小鼠放回笼中。
在给予东莨菪碱和特布他林后30分钟,向每只小鼠注射匹鲁卡品溶液。注射匹鲁卡品后立即把小鼠放入温度为28至30摄氏度的培养箱中进行观察。随后,持续监测小鼠行为,直至诱发癫痫持续状态(SE)。若观察到符合Racine分级3级或以上标准的边缘运动性癫痫发作,记录时间并继续监测小鼠。
一旦持续性运动性癫痫发作超过2分钟,即将小鼠放入室温下的新笼子中,并继续监测3小时,以确定其惊厥性癫痫发作是否持续以及是否诱发了癫痫持续状态(SE)。随后,在癫痫持续状态发作后3小时,通过注射10毫克/千克的地西泮溶液终止行为学上的急性癫痫发作。地西泮注射后,为每只小鼠给予1毫升5%葡萄糖溶液,以促进恢复。
在诱导癫痫持续状态(SE)后的第1天,称量小鼠体重,并将其继续留在培养箱中额外一天。在诱导SE后的第2天,再次称量小鼠体重,然后将其放回原饲养笼中。提供湿润的食物以促进恢复。最后,在匹罗卡品处理后7天内每天测量动物的体重,如果体重未增加,则给小鼠注射5%葡萄糖。
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