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脂肪组织或脂肪库主要存在于腹膜的大网膜、肠系膜、子宫、性腺和脾门静脉区域,可能为转移期间的癌细胞定植提供合适的微环境。
要分离这些腹膜脂肪库,首先取一只安乐死的雌性小鼠。通过腹膜壁做一个中线手术切口,露出其内脏器官。现在,找到胃和胰腺脾脏复合体上存在的大网膜脂肪并将其提取出来。切除卵巢周围的性腺脂肪。此外,去除包裹子宫角的子宫脂肪。随后,切开小肠和幽门之间的连接处,释放附着在肠道上的肠系膜脂肪。最后,提取连接脾脏远端和胰腺的脾门脂肪细带。
将解剖的脂肪组织保存在合适的冷冻缓冲液中,以保留组织生理机能。分析这些腹膜脂肪组织以评估定植转移癌细胞的存在。
由于采集腹膜脂肪库构成内脏切除,因此通过腹膜壁在腹股沟附近做一个中线切口,以暴露内脏器官。要切除大网膜脂肪,请用镊子将脾脏从腹膜腔中延伸出来,以暴露大网膜胰腺复合体。
对于性腺脂肪,用镊子提起卵巢周围的性腺脂肪,并通过切断组织连接将其切除。立即将组织放入冰冷的PBS中。接下来,使用镊子取出子宫角周围的子宫脂肪,并通过切割组织连接进行切除,然后立即将组织放入冰冷的 PBS 中。
获取肠系膜脂肪时,切开小肠和幽门的交界处。用镊子牢牢抓住小肠的自由端,慢慢将其从肠系膜脂肪上剥离。使用解剖剪刀从肠系膜根部释放肠系膜脂肪。然后,立即将组织放入冰冷的PBS中。
最后,要去除脾门脂肪,请使用镊子抬起脾脏的远端,露出连接脾门和胰腺的细脂肪带。切除脾门脂肪,首先将其从胰腺中释放出来,然后小心地将其从脾脏中解剖。然后,立即将组织放入PBS中。