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癌症研究
0 次观看 • 3:41 分钟 • April 30th, 2023
存在于腹膜的大网膜、肠系膜、子宫、性腺以及脾门静脉区域的脂肪组织或脂肪储存部位,可能在转移过程中为癌细胞定植提供适宜的微环境。
为了分离这些腹膜脂肪组织,首先取一只已处死的雌性小鼠。通过腹膜壁做一条正中手术切口,以暴露其内脏器官。接着,找到覆盖在胃和胰腺-脾脏复合体上方的大网膜脂肪并将其取出。切除围绕卵巢的性腺脂肪。进一步移除包绕子宫角的子宫脂肪。随后,切断小肠与幽门之间的连接,以释放附着在肠管上的肠系膜脂肪。最后,取出连接脾脏远端与胰腺之间的细带状脾门静脉脂肪。
将分离的脂肪组织置于适当的冷缓冲液中保存,以维持组织的生理状态。分析这些腹膜脂肪组织,以评估是否存在定植的转移性癌细胞。
由于采集腹膜脂肪需要移除内脏器官,因此需在靠近腹股沟乳头处沿中线切开腹膜壁,以暴露内脏器官。为切除大网膜脂肪,用镊子将脾脏从腹膜腔向外牵拉,暴露大网膜-胰腺复合体。
对于性腺脂肪,使用镊子提起包围卵巢的性腺脂肪,并通过剪断组织连接将其切除。立即将组织置于冰上预冷的磷酸盐缓冲液(PBS)中。接着,使用镊子提起包围子宫角的子宫脂肪,剪断组织连接后将其切除,并立即将组织置于冰上预冷的磷酸盐缓冲液(PBS)中。
获取肠系膜脂肪时,剪断小肠与幽门之间的连接处。用镊子牢固夹住小肠的游离端,缓慢将其从肠系膜脂肪上剥离。使用解剖剪将肠系膜脂肪从肠系膜根部释放。随后立即将组织置于预冷的磷酸盐缓冲液(PBS)中。
最后,为了去除脾门脂肪,用镊子提起脾脏远端,以暴露连接脾门与胰腺的细薄脂肪带组织。先将脾门脂肪从胰腺上游离,再小心地从脾脏上剥离,从而切除脾门脂肪。随后立即将组织置于 PBS 中。
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