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癌症研究
0 次观看 • 3:53 分钟 • April 30th, 2023
移植技术可将细胞或组织碎片植入受体动物的特定体内位点,有助于研究微环境在肿瘤发生和转移中的作用。
首先,将一只免疫缺陷的雌性小鼠麻醉后置于俯卧位。在背侧中线位置做手术切口,暴露其生殖道。找到位于卵巢和输卵管附近的卵巢脂肪垫。使用尖头针在脂肪垫上做切口,刺入深度约为脂肪垫的一半,注意不要损伤卵巢。
接下来,将实验细胞的冷悬液与合适的基底膜基质混合后,注射到脂肪垫切口内。让基质凝固,以固定细胞。将卵巢脂肪垫复位至腹腔内,并缝合切口。让小鼠恢复。
成功移植后,脂肪垫可提供适宜的微环境,促进注射细胞的扩增。每周检查小鼠,观察移植细胞在卵巢脂肪垫上的生长情况。
根据文本方案麻醉一只同源小鼠后,使用40号电推剪剃除手术区域面积两倍大小的毛发。依次使用聚维酮碘和70%乙醇进行三次外科刷洗。随后,将动物移至解剖显微镜下。
然后,使用手术刀在卵巢脂肪垫正上方的背内侧位置做一切口,暴露生殖道。随后,用无菌洞巾覆盖该区域。接着,用钝头精细镊子小心地将卵巢脂肪垫通过切口向中线方向牵出,尽量减少对神经和主要血管的损伤。
为防止移植组织生长迟缓,应尽可能精确地切开脂肪垫,因为将脂肪垫完全撕裂或穿孔会导致出血。必要时应使用止血剂以控制出血。
使用28号斜面针头,在卵巢上方3至4毫米处的卵巢脂肪垫内做一个2至4毫米深的切口,确保针头仅穿透脂肪垫约一半深度。对于细胞移植,用30号针头的注射器吸取10至20微升细胞基底膜基质混合物,将其注入脂肪垫切口内。
进行输卵管移植时,使用精细镊子夹取输卵管,并将其置于预冷的10至20微升基底膜基质中。然后,用0.1至10至20微升XL带刻度滤芯吸头吸取组织与基底膜基质的悬浮液,将其释放至脂肪垫切口内。静置5分钟,待基底膜基质凝固后,将生殖道复位至腹膜内。
用两针外科缝线缝合肌肉,并使用小型伤口夹或外科缝线闭合皮肤。移植手术后,按照文本方案让动物恢复。
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