0 次观看 • 2:10 分钟 • April 30th, 2023
单细胞取样能够从癌细胞悬液中分离出单个活细胞,用于后续分析。
从癌细胞悬液开始进行分离。将所需体积的细胞悬液转移至玻片上。静置玻片一段时间,以减少颗粒运动并使细胞沉降。
现在,将载玻片转移至配备有与微毛细管尖端相连的显微操作仪的显微镜下。这种高精度仪器可在显微水平上实现对样本中细胞的物理操作。
将微毛细管尖端移至单个目标细胞附近。通过施加负压,将目标细胞吸入微毛细管中。随后,立即将微毛细管直接转移至含有所需收集缓冲液的离心管中。
将微毛细管内的内容物推出,使捕获的单个细胞释放到缓冲液中。将分离出的活单细胞置于冰上保存,直至进一步分析。
进行显微操作时,将100微升细胞悬液全部转移至载玻片上。然后将载玻片置于配备显微操作仪的显微镜下,静置5分钟使细胞沉降。接着,在0.2毫升PCR管中加入2微升细胞裂解主混合液,并置于冰上。使用显微操作仪在1微升1×磷酸盐缓冲液中捕获单个细胞。
然后,将细胞直接转移至 2 微升的细胞裂解主混合液中。使用台式微量离心机以 2000 × g 短暂离心 3 秒,使液体聚集于离心管底部。
本文展示了一种从异质性细胞悬液中分离单个细胞的精确技术,可用于后续的单细胞分析。该方案利用显微操作仪和微毛细管系统,对单个活细胞进行物理性挑选并转移,以进一步开展基因组或分子表征。
单细胞显微操作可实现对单个癌细胞的精确分离,支持高分辨率的下游分子分析。该技术对于解析细胞异质性、提高早期发现和转化研究中的预测可靠性至关重要。将这种高精度分离技术整合到研发工作流程中,有助于加强靶点验证和基于风险评估的项目组合决策。
这种显微操作技术适用于早期发现与临床前研究的交叉领域,能够从异质性癌细胞悬液中实现单细胞分析。
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最后更新:22 八月 2026