使用显微操作进行单细胞取样：一种从癌细胞悬液中分离单个细胞的技术

单细胞取样能够从癌细胞悬液中分离出单个活细胞，用于后续分析。

从癌细胞悬液开始进行分离。将所需体积的细胞悬液转移至玻片上。静置玻片一段时间，以减少颗粒运动并使细胞沉降。

现在，将载玻片转移至配备有与微毛细管尖端相连的显微操作仪的显微镜下。这种高精度仪器可在显微水平上实现对样本中细胞的物理操作。

将微毛细管尖端移至单个目标细胞附近。通过施加负压，将目标细胞吸入微毛细管中。随后，立即将微毛细管直接转移至含有所需收集缓冲液的离心管中。

将微毛细管内的内容物推出，使捕获的单个细胞释放到缓冲液中。将分离出的活单细胞置于冰上保存，直至进一步分析。

进行显微操作时，将100微升细胞悬液全部转移至载玻片上。然后将载玻片置于配备显微操作仪的显微镜下，静置5分钟使细胞沉降。接着，在0.2毫升PCR管中加入2微升细胞裂解主混合液，并置于冰上。使用显微操作仪在1微升1×磷酸盐缓冲液中捕获单个细胞。

然后，将细胞直接转移至 2 微升的细胞裂解主混合液中。使用台式微量离心机以 2000 × g 短暂离心 3 秒，使液体聚集于离心管底部。