什么是单细胞采样？

单细胞采样是一种用于从较大群体中分离单个细胞以进行详细分析的技术。

为什么分离单个细胞很重要？

分离单个细胞使研究人员能够研究群体中个体细胞的异质性和特定特征。

这种技术需要什么设备？

配备微操作器和微毛细管尖端的显微镜对于分离单个细胞至关重要。

分离的细胞如何存储？

分离的细胞通常在收集缓冲液中冰上存储，直到进行进一步分析。

可以对分离的细胞进行哪些类型的分析？

分离的细胞可用于基因组、蛋白质组和其他分子分析，以了解其特性和行为。

使用显微作进行单细胞采样:一种从癌细胞悬液中分离单细胞的技术

JoVE Encyclopedia of Experiments

Cancer Research

0 views • 2:10 min • April 30th, 2023

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单细胞采样可以从癌细胞悬浮液中分离出单个活细胞，用于下游分析。

用癌细胞悬浮液开始分离。将所需体积的该悬浮液转移到载玻片上。让载玻片不受干扰一段时间，以减少颗粒运动并让细胞沉降。

现在，将载玻片转移到配备有连接到微毛细管尖端的显微纵器的显微镜下。这种高精度仪器有助于在微观水平上与样品中的细胞进行物理相互作用。

将

微毛细管尖端引导至靠近单个靶细胞。通过施加抽吸，将目标细胞收集到微毛细管中。现在，将微毛细管直接转移到含有所需收集缓冲液的试管中。

弹

出微毛细管内容物，将捕获的单细胞释放到缓冲液中。将分离的活单细胞储存在冰上，直到进一步分析。

对于显微作，将整个 100 微升细胞悬液转移到载玻片上。然后，将载玻片放在配备显微纵器的显微镜上，让细胞沉降 5 分钟。然后，在 0.2 毫升 PCR 管中，移液 2 微升细胞裂解预混液并在冰上转移。使用显微纵器在 1 微升 1X 磷酸盐缓冲盐水中收集单个细胞。

然后，将细胞直接转移到 2 微升细胞裂解预混液中。使用台式微量离心机以 2000 x g 快速旋转样品 3 秒钟，以收集管底部的液体。