组织切片的脱蜡与复水:一种从FFPE组织切片中去除石蜡并进行组织复水的两步法

0 次观看2:43 分钟 • April 30th, 2023

甲醛固定石蜡包埋(FFPE)技术可将固定、脱水和透明处理后的组织样本长期保存于石蜡块中。FFPE 能在不破坏组织形态学的前提下,有效保存蛋白质及其他重要的细胞内组分。

脱蜡,即去除包埋组织周围石蜡的过程,在对任何福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本进行后续分析之前是一项关键步骤。开始脱蜡时,应选用载有适当厚度、未染色的FFPE组织切片的玻片。

将组织切片浸入二甲苯溶液中,并孵育所需的时间。二甲苯作为一种有机溶剂,可溶解渗透并包埋组织的石蜡。彻底去除石蜡后,即可暴露出已固定并脱水的透明组织样本。

脱蜡后,用无水乙醇处理样本。乙醇可置换并去除组织切片中残留的二甲苯。随后将组织浸入浓度递减的乙醇溶液中。此过程可使组织重新水化,以便进行后续的组织学分析。

最后,将载玻片静置所需的时间。此步骤可使乙醇和水蒸发,从而获得干燥的复水组织切片。

首先,准备10微米厚的未染色福尔马林固定石蜡包埋切片。将载玻片放入玻璃载玻片架中,并加入二甲苯,确保载玻片上所有组织均被浸没。将载玻片在二甲苯中放置15分钟。然后,用移液器吸头固定载玻片,倒出二甲苯,防止载玻片滑落。重新加入与之前相同液面高度的二甲苯,重复孵育步骤。

倒出二甲苯,将载玻片架中加入100%乙醇,确保载玻片上的所有组织完全浸没。将载玻片在乙醇中放置3分钟。随后,更换为新鲜乙醇,继续孵育2分钟。倒掉乙醇并取出载玻片。小心地将载玻片正面朝上放置于干净的纸巾上,静置干燥10分钟。