组织切片的脱蜡和再水化:从 FFPE 组织载玻片中去除石蜡,然后进行组织再水化的两步程序

0 次观看2:43 分钟 • April 30th, 2023

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福尔马林固定石蜡包埋或FFPE技术允许在石蜡块内保存固定、脱水和清除的组织标本,以便长期储存。FFPE 在不影响组织形态的情况下保留蛋白质和其他重要的细胞内成分。

脱蜡或去除包埋组织周围的石蜡是处理任何FFPE组织标本进行下游分析之前的关键步骤。要开始脱蜡,请从载玻片开始,载片上携带具有适当厚度的未染色的感兴趣的FFPE组织切片。

将组织切片浸入二甲苯浴中并孵育所需的时间。二甲苯是一种有机溶剂,可溶解嵌入并渗透组织的石蜡。完全去除石蜡后,露出固定和脱水的透明组织标本。

脱蜡后,用无水乙醇处理标本。乙醇从组织切片中置换并去除任何二甲苯痕迹。随后,将组织浸入浓度降低的乙醇中。该过程使组织重新水化以进行下游组织学分析。

最后,在所需的持续时间内保持幻灯片不受干扰。此步骤允许乙醇和水蒸发并获得干燥的再水化组织切片。

首先,准备10微米未染色的福尔马林固定石蜡包埋切片。将载玻片放入载玻片支架中,并用二甲苯填充,确保载玻片上的所有组织都浸没在水中。将载玻片在二甲苯中放置 15 分钟。然后,倒出二甲苯,同时用移液器吸头握住载玻片,以免它们掉落。倒入更多的二甲苯至与之前相同的水平,然后重复孵育。

出二甲苯,用 100% 乙醇填充载玻片支架,确保载玻片上的所有组织都完全浸没。将载玻片在乙醇中放置 3 分钟。然后,用新鲜乙醇代替乙醇,让它们再孵育两分钟。倒掉乙醇并取出载玻片。小心地将它们正面朝上放在干净的纸巾上,让它们干燥 10 分钟。

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最后更新:1 八月 2026