鸡胚尿囊膜收获：一种从鸡蛋中分离携带肿瘤移植物的尿囊膜的方法

绒毛尿囊膜（CAM）是一种胚外膜，紧密附着于完整鸡蛋的内壳膜上。CAM 是进行肿瘤移植和建模的理想体系，因为该膜天然缺乏免疫功能且具有高度血管化特征。

为了收获带有肿瘤的绒毛尿囊膜（CAM），首先取一枚已成功移植肿瘤且CAM发育完全的有活力的受精鸡卵。向CAM中加入多聚甲醛。多聚甲醛可交联膜蛋白，使膜变得更坚硬，从而便于收获。

接下来，沿蛋的边缘剪开，将上半部分蛋壳与其余蛋内容物分离，确保带有肿瘤的尿囊绒毛膜（CAM）仍附着在被移除的蛋壳上。抓住并轻轻提起CAM的一侧边缘，使其从蛋壳上平缓剥离。

随后，将收获的CAM置于多聚甲醛中，肿瘤移植物朝上。多聚甲醛可保存CAM及肿瘤移植物的形态，从而为后续多种分析制备完整的膜结构。

孵育结束后，将鸡蛋放置在实验台面上。使用注射器刺穿每个鸡蛋的薄膜敷料，并在每个绒毛尿囊膜上加入约 300 µL 的 4% 多聚甲醛，以轻微固定组织，便于后续收获操作。

用剪刀剪去上半部分蛋壳，保留附着的尿囊绒毛膜。将蛋壳修剪至直径约3厘米，确保包含背根神经节和肿瘤细胞移植区域的尿囊绒毛膜位于蛋壳碎片中央。然后用精细镊子夹住尿囊绒毛膜，将其从蛋壳上分离，并转移至6孔板的一个孔中，每孔预先加入2毫升4%多聚甲醛固定液。