0 次观看 • 3:02 分钟 • April 30th, 2023
原位接种有助于将癌细胞递送至与组织组织学类型相匹配的受体动物器官或部位。首先,将一只麻醉后的免疫缺陷裸鼠仰卧位固定。
接下来,在颈部区域做一个外科切口以暴露唾液腺。移开唾液腺并解剖带状肌,以暴露其下方的气管和甲状腺。
甲状腺是一个内分泌腺,由两个叶组成,分别位于气管两侧并环绕甲状软骨。这两个叶由一条称为峡部的细条状甲状腺组织连接。
现在,用合适的缓冲液在注射器中制备甲状腺癌细胞悬液。小心地将细胞悬液注射到小鼠的甲状腺叶中。
随后,将唾液腺复位并缝合切口。让小鼠恢复,并每周监测小鼠,观察甲状腺叶内原位肿瘤的生长情况。
进行原位甲状腺肿瘤细胞接种时,将一份 Cal62 细胞悬浮于 5 微升 PBS 中,并向 7 周龄的 BALB/c 裸鼠皮下注射 100 微升镇痛剂和 100 微升抗生素。确认小鼠对足趾夹捏无反应后,将其置于解剖显微镜下,并用聚维碘酮对小鼠颈部进行消毒。
接着,在皮肤上做一个约2厘米的切口,移开唾液腺以暴露颈部。使用解剖镊和/或剪刀分离带状肌,暴露气管和甲状腺,并使用10微升注射器将5微升肿瘤细胞悬液注射至位于环状软骨侧方的右侧甲状腺叶。
当所有细胞输送完毕后,复位唾液腺,并使用丝线编织、带涂层、不可吸收的缝合线关闭切口。随后,对伤口区域涂抹碘伏,并将小鼠置于加热毯上,在密切监测下直至其完全恢复。